ELISA za virusni hepatitis

9. marec 2017, 16:25 Strokovni članki: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3.608

Za odkrivanje virusnega hepatitisa v telesu zdravilo široko uporablja encimski imunski test, ki temelji na odkrivanju koncentracije in vrste antigenov z uporabo protiteles in encimov. Izvaja se v fazah, z laboratorijskimi raziskavami, z visoko natančnostjo indikacij. Odvisno od količine in razreda protiteles, barve in koncentracije encima, ki uporablja ELISA, in zato zdravnik diagnozo bolezni, spremembe.

Kaj je ELISA?

Prisotnost virusnega hepatitisa v telesu bolnika je določena z uporabo serološke metode analize krvi za prisotnost virusa HCV in označevalcev (teles in protiteles), ki to kažejo. Encimsko vezani imunski test (ELISA) preučuje različne viruse, spojine z nizko molekulsko maso, makromolekule, njihove kvalitativne in kvantitativne kazalnike z uporabo manifestacije reakcije na njihove antigene. V ta namen uporabite encim kot oznako za registracijo signala. Vse pogosteje se uporablja v medicini, ker ELISA jasno ugotavlja, da so antigeni dobro opredeljeni, ne da bi jih zmedli z drugimi, in je zelo občutljiva na prisotnost invazije pri virusnem hepatitisu.

Pomanjkljivost takšne diagnoze je nezmožnost ugotoviti vzrok bolezni, saj ta metoda kaže le reakcijo imunskega sistema. Na rezultate analize vpliva cepljenje, ki je bilo opravljeno prej. 8 ur pred analizo se priporoča, da se ne jede nikotin, alkohol. Osnova testa ELISA je encimski in imunski odziv telesa na virus. Biološke molekule se vežejo na celico in njene elemente, mikroorganizme, odkrijejo virus, nato delajo encime, ki vam omogočajo, da izrazite imunski odziv v vidnem in merljivem parametru.

Indikacije za analizo

Virusni hepatitis v telesu lahko povzroči rak in cirozo jeter. Pomembnost pravočasne diagnoze je nesporna. Primarna metoda diagnoze je test ELISA, ki z visoko natančnostjo določa prisotnost virusa HCV (IgM in IgG) ter aktivnost njegovih elementov v sledovih. Obvezni testi za prehod virusnega hepatitisa: t

Osebe z rizičnimi skupinami (odvisniki od drog, osebe z aidsom, zaposleni v zdravstvenih in kazenskih organih).
Osebe z akutnim ali kroničnim hepatitisom.
Nosečnice in nosečnice, ki načrtujejo nosečnost.

ELISA prepozna bolezen v kateri koli fazi. Rezultati analize so v povprečju pripravljeni v 2 dneh.

Merila, ki določajo pomen analize

ELISA test določa prisotnost protiteles razreda IgG, IgM, IgA. Pri diagnosticiranju virusnega hepatitisa zdravnik ne posveča pozornosti njihovemu tipu, saj prisotnost kakršnekoli takšne manifestacije virusa HCV že kaže na akutno ali kronično fazo bolezni. V zgodnjih fazah bolezni se raven IgM dvigne (5 dni po okužbi); 15. in 20. dan se pojavijo protitelesa IgG, ki lahko ostanejo v človeški krvi že dolgo po zdravljenju; IgA se pojavi po 10-14 dneh, po zdravljenju se zmanjša.

Če se IgG in IgA zaznajo po uporabi zdravil in njihova raven ostane enaka - nosilec ima kronično obliko hepatitisa. Pomembno merilo testa bo jasna opredelitev razreda razpoložljivih protiteles in njihove količine. Na podlagi tega lahko veste ne samo o prisotnosti bolezni, temveč tudi o fazi njenega razvoja. Z odkrivanjem takšnih elementov v krvi pacienta je mogoče predpisati pravilno in pravočasno zdravljenje, da se preprečijo resnejše posledice.

Kako je to storjeno?

Dodelite neposredni in ne neposredni test ELISA. Direktne faze:

Zbiramo biološki material in ga damo v posebne luknje.
V 15-30 minutah antigeni pritrjeni na površino vdolbinic.
Dodamo protitelesa na vdolbinice na ugotovljeni antigen. Vse je ostalo 1 do 5 ur.
Odstranite nepovezane antigene (nalijete vsebino v vdolbinice).
Vdolbinice izperite s posebno raztopino.
Dodajte raztopino encima v vdolbinice. Pustite 30 minut - 1 uro.
Uporaba kolorimetrije (odkrivanje barve in koncentracije barve vsebine v vrtini, primerjava s kazalniki, ki so neposredno sorazmerni koncentraciji virusa).

Uporaba za diagnozo posredne ELISA bo dala natančnejši rezultat.

Posredna metoda ELISA poteka z uporabo neoznačenih protiteles proti najdenim antigenom in naknadnim dodajanjem označenih na njih. Najprej se odvzame kri od pacienta in se razširi skozi vdolbine za 15-30 minut. (protitelesa so fiksirana z luknjami). Nato se v njih vnesejo neoznačena protitelesa za 1–5 ur (tvori se povezava protiteles z antigeni - imunski kompleks). Nato iz vdolbinic nalijemo nevezane mikroelemente in jih speremo s posebno raztopino. V naslednji fazi laboratorijski tehnik doda v vdolbinice označene elemente v sledovih za 15-30 minut. (to veže neoznačeno z označeno z nastankom kompleksa "protiteles-protitelo-antigen"). Pri odcejanju in pranju z raztopino se ponovno odstranijo ekstra (ohlapno). Sledi encim, ki spremeni barvo v 5-30 minutah. ostanki v luknjah in barvni podatki se primerjajo s podatki tabelarnih kazalcev. Posredna ELISA je bolj natančna.

Kaj prikazuje test ELISA za virusni hepatitis?

ELISA omogoča zaznavanje prisotnosti okužbe (virusi hepatitisa vseh vrst, HIV, herpes, sifilis, citomegalovirus, ošpice, rdečka, virus mumpsa, virus Epstein-Barr), je marker avtoimunskih bolezni, rakavih celic. Označuje kršitve reproduktivnih funkcij (spremembe testosterona, prolaktina, estradiola in progesterona), okvaro ščitnice, infestacija s helmiti, klamidija. Učinkovito za odkrivanje ureaplasmoze, oslovskega kašlja, virusa Dange, virusa zahodnega Nila, Borrelia. Seznam definicij je visok, vključuje veliko elementov.

Potrditev rezultatov

Določanje antigena virusa HCV z ELISA daje 98% natančnost. Uporablja se tudi za ponovno testiranje biološkega materiala z mehkimi predhodnimi indikatorji. Prisotnost antigenov IgM ni indikator za akutni hepatitis in zahteva dodatne raziskave. Ko se test ELISA ponovi, se rezultati pokažejo za 90–100%. V primeru minimalnega odstopanja se kot indikator upošteva povprečna vrednost. Za največjo natančnost v smislu zdravniki svetujejo vzporedno z izvajanjem biokemične analize krvi. Za testiranje rezultatov po encimskem imunskem testu lahko uporabite druge diagnostične metode.

Raziskave virusnega hepatitisa po metodi ife

ELISA pri diagnozi virusnega hepatitisa. Sposobnosti encimske imunske preiskave

Specifična laboratorijska diagnoza virusnega hepatitisa temelji na uporabi imunokemijskih in molekularno-bioloških raziskovalnih metod. Glavne imunokemijske metode so radioizotop ali radioimunska (RIA) in imunoanaliza (ELISA). Imunokemijske diagnostične metode temeljijo na specifičnem medsebojnem delovanju antigena - protitelesa s kasnejšo identifikacijo kompleksa s pomočjo posebnih oznak. Najpogostejši encimski imunski test.

Prva poročila o uporabi encimskega imunskega testa. kot metodo za določanje snovi so bile objavljene leta 1971 hkrati dve raziskovalni skupini - B. Van Weemen, A. Schuurs in E. Engvall, P. Perlmann. Enzimski imunski preskus temelji na naslednjem načelu: na trdni fazi, ki večinoma uporablja površino vdolbin polistirenske tablete, je fiksiran antigen infekcijskega sredstva ali protitelesa (pogosto mešanica protiteles) z antigeni, ki jih je treba odkriti. Ta antigen ali protitelesa, ki so fiksirana na trdni fazi, imenujemo imunosorbent.

Kot rezultat inkubacije imunosorbenta in testnega seruma v prisotnosti detektabilnega sredstva se vežejo na kompleks antigen - protitelo. Po postopku pranja, med katerim odstranimo nevezane antigene in protitelesa, izvedemo inkubacijo s konjugatom. Kot konjugat za detekcijo HBsAg uporabljamo anti-HBs pri odkrivanju protiteles proti virusu hepatitisa C - protitelesa proti humanim imunoglobulinom (antivirusnemu konjugatu), označenim s hren peroksidazo. Kot rezultat te inkubacije pride do vezave na že obstoječe antigenske komplekse - protitelo dodatno uvedenega konjugata. Po odstranitvi nevezanega konjugata (pranje) se substrat vnaša v vdolbinice. Pri uporabi konjugata peroksidaze se vodikov peroksid uporablja kot substrat v kombinaciji z indikatorjem, ki se najpogosteje uporablja kot ortofenilendiamin (OPD) ali tetrametilbenzidin (TMB). Rezultat se oceni fotometrično.

Kakovost in zanesljivost analitičnih zmogljivosti encimske imunske metode je označena s številnimi merili, ki vključujejo občutljivost, specifičnost, natančnost in ponovljivost.

Občutljivost je najmanjša količina snovi, ki jo lahko odkrijemo z encimskim imunskim preskusom. V tem primeru je spodnja meja občutljivosti te metode koncentracija preskusne snovi v vzorcu, ki ustreza najmanjšemu pozitivnemu rezultatu določitve, ki se statistično pomembno razlikuje od kazalnikov namerno negativnih vzorcev. Občutljivost IFTS je odvisna od številnih okoliščin, povezanih z načrtovanjem preskusnega sistema (afiniteta imunosorbenta, kakovostjo ekstrakcijskega in puferskega sistema) ter ločljivostjo in natančnostjo metode registracije.

Specifičnost - sposobnost natančno določiti sestavine, za določitev katerih je zasnovan ta encimski imunološki preskus. Specifičnost ELISA je določena predvsem z navzkrižno reakcijo protiteles ali antigenov (to je sestava, ki se uporablja kot imunosorbent) s sorodnimi spojinami, kot tudi s sestavo inkubacijskega medija (učinek matrike).

Pravilnost - ustreznost povprečne vrednosti rezultatov večkratnih določitev istega kontrolnega vzorca z resnično vrednostjo izmerjenega parametra. Točnost določitve v testu ELISA je odvisna od kakovosti preskusnega sistema in kontrolnega vzorca. Za dobre imunološke testne sisteme so kazalniki pravilnosti v območju 90-110%. Posebnost biomedicinskih raziskav v ELISA je nezmožnost določitve točne vrednosti, zato se kot prava vrednost vzame povprečje več strokovnih laboratorijev. Statistično merilo za pravilnost je aritmetično povprečje in stopnja njegovega odstopanja od dejanske vrednosti, izražena v odstotkih.

Ponovljivost - sposobnost testnega sistema, da pri ponovljenih študijah istega vzorca pokaže enake vrednosti. Ponovljivost je odvisna od naključnih napak (napak) med postopkom reakcije in od kakovosti preskusnih sistemov ter od natančnosti metode zapisovanja rezultatov. Domneva se, da obnovljivost istih kontrolnih vzorcev istega podjetja v različnih laboratorijih ne sme presegati vrednosti koeficienta variacije 15%.

Za določanje virusnih označevalcev hepatitisa obstaja več specifičnih shem ELISA: a) direktni encimski imunski preskus; b) indirektni encimski imunski test; c) konkurenčno zaviranje; c) metoda „pasti“ ali „zajetje“.

Pogosteje se uporabljajo molekularno-biološke metode za diagnosticiranje virusnega hepatitisa, polimerazne verižne reakcije in hibridizacije. Te metode, zlasti PCR, omogočajo zaznavanje zelo majhnih količin specifične virusne DNA ali RNA in s tem sodijo replikacijo, v nekaterih primerih pa tudi replikacijsko aktivnost.

Test krvi proti hepatitisu C

Hepatitis C je ena najpogostejših bolezni jeter, ki se pojavi pri okužbi z virusom hepatitisa C (HCV), ki vstopa v telo predvsem, ko pride v stik s krvjo okužene osebe. Pri 70-80 odstotkih bolnikov z akutnim hepatitisom C ni nobenih simptomov bolezni, le v nekaterih primerih, po določenem času po okužbi, obstajajo manifestacije bolezni, ki se izražajo v utrujenosti, bolečinah v trebuhu, izgubi apetita, temnem urin, bruhanje, slabost, blatni iztrebki, zlatenica, bolečine v sklepih. Praviloma se simptomi pojavijo 6-7 tednov po okužbi, vendar trajanje nastopa znakov bolezni variira od 2 tednov do 6 mesecev. Če se pojavijo zgoraj navedeni simptomi, se morate posvetovati z zdravnikom za nalezljive bolezni in opraviti preiskavo krvi za hepatitis C. Diagnoza hepatitisa, ki se izvede pravočasno, lahko odkrije bolezen v zgodnjih fazah in znatno poveča možnosti za okrevanje.

Ko je načrtovan test na hepatitis C

Primeri, ko je potreben test za hepatitis C:

med nosečnostjo in načrtovanjem družine;
bolniki s simptomi kroničnega ali akutnega hepatitisa;
oseba je v nevarnosti. To so zdravstveni delavci, osebe v zaporu, policisti, ljudje, ki uporabljajo droge, imajo veliko spolnih partnerjev, imajo AIDS, so na hemodializi in drugi.

Priprava na analizo hepatitisa C

Posebna priprava za analizo hepatitisa C ni potrebna. Za analizo vzamemo kri iz vene na prazen želodec, ob istem času pa je treba po zadnjem obroku opraviti vsaj osem ur.

Testi ELISA za hepatitis C

Prva analiza, ponavadi predpisana za diagnozo hepatitisa C - ELISA test (encimsko vezan imunski test). S testi ELISA za hepatitis C je mogoče odkriti prisotnost protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCVAb) v krvi. Če je rezultat testa ELISA pozitiven, potem kaže na prisotnost telesa z virusom hepatitisa C. Vendar 40% ljudi, ki so imeli pozitiven test ELISA, ne odkrije virusa v krvi. Ta pojav imenujemo lažno pozitiven rezultat. Tudi s pomočjo testa ELISA se preveri donorska kri.

RIBA za hepatitis C

Analiza RIBA za hepatitis C se uporablja za potrditev pozitivnega rezultata ELISA. Metoda rekombinantnega imunoblotinga (RIBA) je natančnejša študija prisotnosti protiteles proti virusu hepatitisa C. Prisotnost virusa hepatitisa C v telesu prav tako ne določa pozitivnega rezultata, temveč potrjuje prisotnost protiteles.

Testiranje hepatitisa C PCR

Da bi odkrili prisotnost virusov hepatitisa C v krvi (HCV RNA) in postavili diagnozo, najpogosteje uporabijo analizo po metodi polimerazne verižne reakcije (PCR). Ta študija omogoča natančno odkrivanje prisotnosti majhne količine virusa v krvi. Analiza PCR za hepatitis C lahko razkrije prisotnost virusa že 5 dni po okužbi, veliko pred pojavom protiteles. Če je rezultat analize PCR pozitiven, pomeni prisotnost aktivne okužbe.

Obstajajo takšne spremembe analize PCR:

kvantitativni PCR, ki omogoča določanje ne le dejstva prisotnosti virusa, ampak tudi virusne obremenitve (količine virusa). Ta indikator je zelo pomemben za določanje učinkovitosti zdravljenja;
genotipizacija, ki vzpostavlja genotip virusa hepatitisa C, kar je pomembno za določanje trajanja in taktike zdravljenja. Obstaja več kot 10 genotipov virusa hepatitisa C, vendar je za klinično prakso dovolj opredeliti pet najpogostejših tipov: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Izvede se kvantitativna analiza PCR:

s kvalitativnim pozitivnim testom za prisotnost RNA virusa hepatitisa C v serumu;
za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
določiti taktike zdravljenja bolnika.

Med resnostjo hepatitisa C in količino virusa v krvi ni neposredne povezave. Koncentracija virusa vpliva na infektivnost bolezni, to je večja količina virusa v krvi pacienta, večje je tveganje prenosa virusa, na primer prek spolnega stika ali z matere na otroka. Tudi učinkovitost zdravljenja je odvisna od koncentracije virusa. Med zdravljenjem je ugoden dejavnik nizka virusna obremenitev, zelo visoka pa je neugodna.

Opravljena je analiza genotipov:

s kvalitativnim pozitivnim testom za prisotnost RNA virusa hepatitisa C v serumu;
za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
določiti taktike zdravljenja bolnika;
napovedati kroničenje infekcijskega procesa;
za določitev napredovanja bolezni.

Odkrivanje genotipa virusa je zelo pomembno za določanje trajanja zdravljenja, kar je pomembno, saj ima interferon širok razpon stranskih učinkov in nizko toleranco za paciente.

Analiza dekodiranja hepatitisa C

Običajno virusna RNA, protitelesa proti njim in antigeni so popolnoma odsotni. Prisotnost protiteles v krvi kaže na prisotnost kroničnega ali akutnega hepatitisa C ali obnovitvenega obdobja. Če je v krvi prisotna HCV RNA, ki je določena z analizo PCR, to kaže na prisotnost virusa v krvi.

Z napačno preskusno tehniko, transportom in anomalijami krvi lahko PCR analiza včasih pokaže lažne pozitivne rezultate. Analize ELISA in RIBA v zgodnjih fazah bolezni, ko telo še ni proizvedlo zadostne količine protiteles, lahko kažejo lažno negativni rezultat.

Če pri dešifriranju testa za hepatitis C dobimo pozitivne rezultate, se je treba za nadaljnjo diagnozo in zdravljenje obrniti na zdravnika za infekcijske bolezni in gastroenterologa.

Segmentirani nevtrofilci so bili znižani

Otroške trombocite so normalne, povišane, znižane

Ščitnični hormon TGT

Diagnoza hepatitisa

Ne moremo takoj ugotoviti prisotnosti hepatitisa v telesu, saj lahko inkubacijska doba bolezni traja do štiri tedne. Ko se pojavijo prvi znaki bolezni, se v prizadetem organizmu pojavijo korenite spremembe v sestavi krvi: biokemična analiza poroča o resnih zdravstvenih težavah in prisotnosti patogenega virusa. Vendar pa za dokončno diagnozo ni dovolj darovati kri za hepatitis, kot tudi podrobno diagnozo hepatitisa.

Laboratorijska diagnoza hepatitisa

Zaželeno je, da se izvede po koncu inkubacijske dobe, tako da lahko zdravnik z največjo možno natančnostjo določi bolezen jeter, ki je prisotna v telesu. V nasprotnem primeru predpisano zdravljenje ne bo dalo želenega terapevtskega učinka in celo poslabšalo prevladujočo klinično sliko.

Diagnoza hepatitisa A

Značilno je, da se diagnoza hepatitisa A začne s podrobnim spraševanjem pacienta in imenovanjem številnih testov, ki jih je treba opraviti čim prej. To je:

biokemični krvni test;
popolna krvna slika;
Metoda PCR;
ELISA;
koagulogram.

Če Botkinova bolezen napreduje, potem opazimo nenormalni skok bilirubina, AlAT in AsAT, timolnega vzorca po rezultatih biokemične analize krvi. Poleg tega nastajajo specifični anti-HAV IgM, ki so neizpodbitno dejstvo prisotnosti hepatitisa A. t
Na splošno je analiza krvi določena z upadom levkocitov, skokom ESR in limfocitozo. In kljub temu je najbolj zanesljiva metoda PCR, ki določa indikator RNA patogenega virusa.
Poleg tega zdravnik preuči simptome bolezni, nato pa lahko postavi končno diagnozo in preide na najučinkovitejšo terapijo. Potreba po instrumentalnem pregledu je zelo redka. Po uspešnem konservativnem zdravljenju v bolnišničnih pogojih in karanteni bolnika pričakujemo končno okrevanje, hepatitis A pa se ne ponovi.

Diagnoza hepatitisa B

Da bi ugotovili prisotnost virusa hepatitisa B, je možno tudi po rezultatih laboratorijskih testov in za to je prva stvar, ki je potrebna za darovanje krvi za hepatitis. Patogeni virus ima po naravi tri glavne antigene, HBsAg, HBcAg in HBeAg, za katere se v telesu proizvajajo protitelesa. Glavna značilnost te klinične slike je ELISA-ELISA, ki razkriva specifične markerje hepatitisa B.
Takoj je treba pojasniti, da se antigen HBsAg pojavlja v krvi že pred prvimi simptomi hepatitisa in se zanesljivo ugotovi v ledu. Vendar pa negativni test ne izključuje prisotnosti hepatitisa B in zato zahteva uporabo enako učinkovite metode verižne reakcije s polimerazo (PCR).
Če sumite, da je hepatitis B obvezen, je treba opraviti biokemični krvni test, ki ga je priporočljivo preiti na prvo mesto. O individualni obravnavi je treba opraviti biopsijo jeter in ultrazvok peritonealnih organov, ko pa je zgodovina bolezni zelo jasna, ni potrebe po metodah kliničnega pregleda.

Ehogram jeter pri avtoimunskem hepatitisu v fazi kroničnega hepatitisa

Diagnoza hepatitisa C

Da bi postavili to diagnozo, ni dovolj darovati kri za hepatitis, ker lahko virus v telesu prevladuje v latentni obliki. Kljub temu pa so glavni laboratorijski testi vse zgoraj predstavljene analize, kot tudi dodatna učinkovitost biopsije jeter. Ta mikroskopski pregled biološkega materiala (v našem primeru košček jetrnega tkiva) določa obseg patološkega procesa in tkivne fibroze. Vzorčenje materiala poteka pod lokalnimi anestezijo, zapleti takšnega postopka so v medicinski praksi zelo redki.
Če obstaja sum na hepatitis C, je glavna metoda kliničnega pregleda ultrazvok peritonealnih organov. Razlog je preprost: bolezen se pogosto kaže v vidni spremembi prizadete jeter, spremembah v njeni strukturi in velikosti. Na ta način lahko določite:

velikost jeter, vranice, trebušne slinavke in žolčnika;
patološke spremembe v teh organih;
splošni pretok krvi v peritonealnih organih;
optimalno območje za izvajanje biopsije jeter.

Ta metoda kliničnega pregleda določa vse fokalne patologije organa na mikroskopski ravni. Če so jetra zastopana na zaslonu v sivi lestvici, je potrebna takojšnja biopsija, saj siva barva vizualizira prizadeta tkiva "človeškega filtra".

Preprečevanje hepatitisa

Ker se bolezen ne pojavi takoj, je daleč od vseh kliničnih slik, ki se začnejo zdraviti takoj. Bolnik se preprosto ne zaveda obstoja patogenega virusa v telesu, ki se nato hitro razširi v krvni obtok in okuži zdrave jetrne celice.
Da bi se izognili takšni tragični usodi, je priporočljivo upoštevati vse preventivne ukrepe. Takšna pazljivost bo znatno zmanjšala tveganje obolevnosti in vas v prihodnje rešila pred resnimi zdravstvenimi težavami. Spodaj so predstavljena osnovna pravila preprečevanja:

si umijte roke po ulici;
kakovostno predelavo sveže zelenjave in sadja;
opraviti vsa preventivna cepljenja, določena v letnem koledarskem načrtu;
selektivni odnos do spolnih partnerjev;
izogibajte se stiku z bolnimi ljudmi;
uporabite samo brizge za enkratno uporabo in ste še posebej pozorni na transfuzijske postaje.

Prav tako je priporočljivo redno (enkrat na šest mesecev) darovati kri za hepatitis, da se prepriča, da virus ne prodre v telo in ne okuži zdravih jetrnih celic. Če je diagnoza določena, je treba takoj postati ambulantni račun in upoštevati vsa priporočila specialista.

Avtor publikacije:
Syropyatov Sergej Nikolajevič
Izobrazba: Rostovska državna medicinska univerza (Rostova državna medicinska univerza), Oddelek za gastroenterologijo in endoskopijo.
Gastroenterolog
Doktor medicinskih znanosti

Metoda ELISA za odkrivanje hepatitisa

Sodobna medicina je znana po mnogih boleznih jeter. HCV (virusni hepatitis C) je med najpogostejšimi in najbolj nevarnimi, ker se ta okužba pogosto razvije asimptomatično in povzroči kritične zaplete, celo smrt. Zato je pravočasno diagnosticiranje bolezni, ki se izvaja z različnimi metodami, vključno z encimsko imunskim testom (ELISA) za odkrivanje protiteles proti virusu v krvi, izjemnega pomena.

Izjava o okužbi s HCV za diagnozo hepatitisa

V laboratorijski diagnostiki za odkrivanje hepatitisa C (HCV infekcija) se uporabljata dve vrsti metod:

Serološki, ki temelji na odkrivanju protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCV), imenovan tudi ELISA (encimsko vezan imunski test). Namenjen je odkrivanju anti-HCV (IgM in IgG označevalcev), ki se uporabljajo za presejanje in diagnosticiranje hepatitisa C. Oba znaka se lahko odkrijejo v krvi (plazmi) v različnih kombinacijah, kar zahteva ustrezno klinično interpretacijo. Za potrditev prisotnosti anti-HCV se izvaja test RIBA (rekombinantni imunoblot).
Molekularno biološko, namenjeno odkrivanju RNA virusa. Test HCV RNA je predpisan za naslednje kategorije bolnikov:
- z identificiranimi anti-HCV;
- brez zaznanega anti-HCV, vendar z uveljavljenimi epidemiološkimi in kliničnimi podatki, ki zahtevajo izključitev akutne oblike HCV.

RNA virusa lahko odkrijemo v krvi že 14 dni po okužbi, to je pred pojavom anti-HCV, ki se pojavi v prvih 2-3 mesecih.

Za dokončno potrditev diagnoze (še posebej, če je zaznan le eden od dveh markerjev okužbe z HCV) strokovnjaki priporočajo, da se po določenem času opravijo ponavljajoči se testi anti-HCV in HCV RNA.

Odkrivanje hepatitisa z ELISA

Za izvedbo zgodnje diagnoze virusnega hepatitisa, zlasti asimptomatskih, anikteričnih oblik, v serumu se ugotovi prisotnost virusnih proteinov (antigenov) ali protiteles proti njim (ki jih povzroči imunski sistem, ko virusi vstopijo v telo) s pomočjo encimsko vezanega imunskega testa (ELISA). To je univerzalna metoda imunološke diagnoze, njeno bistvo leži v študiji interakcije "antigen-protiteles". Uporablja se v mnogih državah sveta.

Določanje hepatitisa z ELISA omogoča ne le vzpostavitev natančne diagnoze, ampak tudi oceno narave bolezni, pa tudi izbiro kompetentnega in učinkovitega zdravljenja z uporabo tradicionalnih zdravil (interferon, ribavirin), zdravil z neposrednim delovanjem (Sofosbuvir, Daclatasvir) in njihovih generikov indijske in kitajske proizvodnje.

Kadarkoli je mogoče, diagnozo virusnega hepatitisa z ELISA dopolnjuje PCR (verižna reakcija s polimerazo), ki omogoča ugotavljanje prisotnosti virusov hepatitisa v RNA.

Kako natančna je metoda encimske imunske metode

Po strokovnih ocenah je natančnost metode ELISA 95%, kar pomeni, da je pri 95 od 100 bolnikov, ki uporabljajo encimski imunski preskus, prisotnost in količina HCV protiteles - IgM in IgG mogoče zaznati v krvi. Če je rezultat pozitiven, je možno diagnosticirati stik HCV s telesom (ne virus sam, namreč prisotnost protiteles v krvi, ki je lahko posledica že prenesene bolezni).

Vendar pa kljub visoki občutljivosti encimskega imunskega testa (ELISA) pri 40% bolnikov s pozitivnim rezultatom virus morda ne bo zaznan, kar kaže na dvomljiv ali lažno pozitiven rezultat.

Za potrditev pravilnosti rezultatov ELISA se metoda RIBA (rekombinantno imunoblotiranje) uporablja za natančnejše odkrivanje protiteles proti HCV.

Preizkus proti NCV

Učinkovite študije za ugotavljanje prisotnosti protiteles proti virusom hepatitisa vključujejo anti-HCV jedro, ki se uporablja kot potrditveni test, ko dobimo „negotove“ rezultate.

Če se v serumu pri razredčitvi 1: 1000 odkrije jedro anti-HCV, je verjetno diagnosticiran pozitiven rezultat, tj. Bolezen je prisotna.

Če so vzorci v razredčitvi 1: 1000 negativni, pri razredčitvi 1: 200 pozitivni, so potrebne raziskave za prisotnost virusne RNA. V tem primeru najverjetneje ni okužbe s HCV.

Pomembno je razumeti, da se pri kroničnih oblikah HCV protitelesa nenehno zaznavajo, med izločanjem (odstranitvijo iz celic telesa) virusa pa trajajo 4-8 let ali več. Zato prisotnost anti-HCV ne kaže vedno na okužbo telesa in ne omogoča objektivnih zaključkov o aktivnosti procesa.Za pridobitev natančnih podatkov o virusni obremenitvi, stopnji poškodbe jeter, trajanju okužbe in razliki med akutnimi in kroničnimi oblikami bolezni je priporočljivo uporabiti opredelitev spektra protiteles za različne HCV. peptidov. Pomembno je tudi opazovanje njihove kvantitativne in kvalitativne dinamike.

ELISA analiza - od presejanja za HbsAg do kompleksne diagnostike

Z uvedbo sodobnih tehnologij v medicini naraščajo možnosti imunokemijskih diagnostičnih metod, ki so sposobne hitro in natančno prepoznati bolezen, ko so druge metode nemočne. Razumevanje, da je virus hepatitisa B lahko v telesu v zelo nizki koncentraciji, pri katerem ga ni mogoče zaznati niti s tako zanesljivo metodo, kot je PCR, je nujno, da se ponovno proučimo problem diagnosticiranja te bolezni in ocenimo možnosti imunskega testa.

V tem gradivu bomo podrobno analizirali vse, kar se nanaša na to vrsto laboratorijskih raziskav. Spoznali boste, kaj je encimski imunski test in kako se izvaja, kaj je avstralski antigen in kako je določen, kakšne so nerazumljive okrajšave Hbs ag, Hbcor, njihova vloga pri dešifriranju analize, pa tudi veliko koristnih in zanimivih informacij.

Vsebina članka:

Splošne informacije o testu ELISA

ELISA (skrajšano ELISA) je laboratorijska diagnostična metoda, ki lahko odkrije tako antigene kot protitelesa iz številnih okužb, vključno s hepatitisom B. Trenutno znanje o lastnostih virusa in značilnostih imunskega odziva telesa omogoča ne le odkrivanje okužbe, temveč tudi njeno identifikacijo. stopnja, učinkovitost cepljenja in oceni učinkovitost zdravljenja.

Bistvo encimskega imunskega testa

ELISA temelji na reakciji „antigen-protitelo“ oziroma na njenih lastnostih.

V odgovor na invazijo tuje snovi (antigena), ki so zlasti beljakovine virusa, telo proizvaja zaščitne beljakovine - protitelesa. Protitelesa vstopijo v kompleksno reakcijo z antigenom, kar blokira njegovo aktivnost.

O antigenih in protitelesih bomo govorili spodaj, zdaj pa bomo opazili, da so za vsak antigen strogo individualni ali, kot pravijo zdravniki, homologna protitelesa. Če želimo v krvi zaznati specifični antigen, bomo uporabili diagnostično tableto z protitelesi proti njej. Če je v krvi antigen, bo reagiral s protitelesi, ki jih je mogoče zaznati na različne načine. In obratno. Če želimo najti protitelesa, potrebujemo tableto z ustreznim antigenom.

Najpogosteje, diagnostična vrednost nosi samo protitelesa, s katerimi lahko diagnosticirate skoraj vsako okužbo. Posebnost virusa hepatitisa B pa je, da glavno vlogo pri diagnozi igra en antigen - avstralski antigen.

Kako je IFA

Za specifičen primer upoštevajte tipičen postopek ELISA, če želite identificirati protitelesa proti patogenu.

Za diagnostiko uporabimo tableto s 96 vdolbinicami, ki so predhodno nasičene z ustreznim antigenom. Nadalje je postopek naslednji:

serum nanesemo na vse celice;

homologna protitelesa reagirajo z antigenom in se pripnejo na ploščo;

tablete oprane, odstranjevanje nepritrjenih protiteles;

potem se v celice vnese encimska oznaka - snov, ki reagira s protitelesi in povzroči obarvanje vsebine celice.

To je standardni postopek ELISA z barvanjem, ki se uporablja na primer v imunokromatografskih testnih trakovih.

ELISA ni omejena na kvalitativno določanje protiteles ali antigenov patogena. Več celic v tabletah vsebuje več protiteles, intenzivnejša pa je obarvana raztopina. Če primerjamo svojo optično gostoto s kontrolo, lahko sodobna oprema dokaj natančno izračuna koncentracijo protiteles na enoto volumna. Tako se izvede kvantitativni ELISA, merilo merjenja, pri katerem so najpogosteje enote optične gostote (EOP).

Imunokemiluminiscenčna analiza

Danes obstaja več deset vrst ELISA, od katerih ima vsak prednost. Najbolj priljubljena pri diagnozi hepatitisa B je imunokemiluminiscenčna analiza.

Encimatska oznaka za to analizo ni kromatin, kot pri standardnem ELISA testu, temveč posebne snovi - fosforji, ki povzročajo, da kompleks zažara v ultravijolični svetlobi.

S pomočjo posebne naprave - luminometra, lahko natančno določite stopnjo emisije in posledično koncentracijo želene snovi.

Z uporabo metod ELISA določimo skoraj vse obstoječe antigene virusa hepatitisa B in protitelesa proti njim.

Antigeni virusa hepatitisa B: Hbs, Hbe in Hbc

Izraz antigen (antigen) izhaja iz dveh angleških besed: protitelesa - protitelesa in generatorja - proizvajalca. Torej, pod antigen razumeti vse snovi, ki povzroča nastanek protiteles v telesu, da ga. Najpogostejši antigeni so proteinske spojine.

Danes so znani trije antigeni virusa hepatitisa B: hbsag, hbc in hbe.

Avstralski antigen

Protein, ki je del zunanje lupine patogena hepatitisa B, smo odkrili že dolgo pred odkritjem samega virusa. Ta antigen je dobil ime, ker so ga prvič odkrili avtohtoni prebivalci Avstralije. Vendar se sprva beljakovina ni štela za antigen, temveč je bila povsem običajen element krvi med domačini, zavedanje o njeni povezanosti z boleznimi jeter pa je prišlo malo kasneje.

Dolgotrajno ohranjanje antigena v krvi in odsotnost protiteles kaže na možnost nastanka HBeAg-pozitivnega kroničnega hepatitisa B t

Danes v strokovni literaturi ime »avstralski antigen« praktično ni mogoče najti in ga je nadomestila mednarodna kratica - HbsAg (površinski antigen hepatitisa b - površinski antigen hepatitisa B). Poleg tega lahko najdete kratice hbs antigen ali samo hbs. Vsaka od teh okrajšav je sprejemljiva in jo je mogoče dopolniti s snemanjem HBV ali HBV - virusa hepatitisa B (virus hepatitisa b).

Površinski antigen virusa hepatitisa B ima eno izjemno značilnost, zaradi katere je nepogrešljiv diagnostični marker - njegova koncentracija v krvi lahko doseže zelo visoke ravni, do pol miligrama na mililiter krvi. To je zato, ker le majhen del novih HBsAg, ki se oblikujejo med razmnoževanjem virusa hepatitisa B, gredo v konstrukcijo membran novih virusnih delcev, ostalo pa prosto kroži v krvi. Posledično lahko število delcev hbs v krvi preseže število virusov na stotine tisočkrat.

Zaradi tega je avstralski antigen glavni marker pri diagnosticiranju hepatitisa B, ki ga odkrijemo v krvi že 4-6 tednov po okužbi. Ko se tvorijo protitelesa, se površinski antigen postopoma nadomesti z njimi. Če po 6 mesecih HBsAg vztraja, to kaže na prehod okužbe na kronično obliko.

V zadnjem času, ko je bilo mogoče določiti koncentracijo hbs hbs, se je njegova vloga pri diagnozi še povečala, saj lahko zanašanje na raven antigena loči kronični hepatitis B (HBV) od zdravega nosilca in spremlja učinkovitost zdravljenja.

Antigeni jeder

V jedru virusa - nukleokapsidu - so beljakovine, ki nadzorujejo razmnoževanje virusa HBcoreAg in HBeAg.

HBcoreAg, ki ga lahko imenujemo tudi HBCore-antigen, hbc ali jedrni antigen, lahko najdemo le v tkivih jeter, neposredno v jedrih hepatocitov. Ta antigen ni odkrit v krvi in nima diagnostične vrednosti.

Struktura virusa hepatitisa

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - nasprotno, igra pomembno vlogo pri diagnozi. HBeAg in HBcoreAg sta bližnji sorodniki. Imajo veliko podobnost strukture in se večinoma razlikujejo v prostorskem položaju molekul. Za razliko od HBcore, HBe ni del nukleokapsidne stene in prosto kroži v krvi.

Vloga HBe v infekcijskem procesu ni dovolj jasna, vendar so posebnosti njegovega obnašanja in njihovega odnosa s potekom infekcijskega procesa že dovolj raziskane. HBeAg označuje aktivno razmnoževanje virusa in vam omogoča, da zanesljivo določite fazo kroničnega CHB - HBeAg-pozitivnega ali HBeAg-negativnega.

HBe se lahko odkrije v krvi že v inkubacijskem obdobju akutnega virusa hepatitisa B (HBV), medtem ko visoka koncentracija HBeAg 3 tedne najverjetneje kaže na nevarnost kroničnega procesa. Koncentracija HBe je neposredno povezana z vsebnostjo Dane delcev (ti delci virusa hepatitisa B) - večja je količina HBe, večja je koncentracija HBV DNA v krvi.

HBeAg je glavni marker nalezljivosti bolezni. Kri HBeAg-pozitivnih bolnikov je veliko bolj nalezljiva kot HBeAg-negativna. Na primer, pri nosečnicah, pozitivnih za HBe in Hbs, je verjetnost prenosa okužbe na otroka 50%, verjetnost takšnega dogodka pri HBe negativnih, vendar Hbs pozitivnih mater pa je 10-30%.

Hbe določa potek kroničnega hepatitisa. HBeAg-pozitivni kronični hepatitis B ima veliko bolj neugodno prognozo v smislu razvoja ciroze.

To je verjetno vse, kar morate vedeti o antigenih HBV, in preidemo na drugo skupino označevalcev hepatitisa B - protitelesa.

Kaj pomeni pozitiven ali negativen rezultat EIA za hepatitis C?

Da bi natančno določili vrsto hepatitisa po predhodni diagnozi, napovedati potek bolezni, ugotoviti stopnjo njegovega razvoja, z uporabo različnih seroloških študij. Najbolj natančni podatki so pridobljeni po encimskem imunskem testu. Uporaba ELISA hepatitisa C, diagnosticirana v 95% primerov. Prav ta analiza omogoča odkrivanje protiteles proti virusu hepatitisa C (HCV antivirus) in ocenjuje ne le stopnjo aktivnosti patološkega procesa, temveč tudi stopnjo učinkovitosti protivirusne terapije, ki jo je predpisal zdravnik in jo izvaja pod njegovim nadzorom.

Ko so potrebne raziskave in njene značilnosti

Hepatitis C je najnevarnejša vrsta te bolezni, saj ima dolgo latentno (latentno) obdobje in nevarne posledice. Da bi se izognili videzu in razvoju pravilne in pravočasne diagnoze, je eden izmed najbolj informativnih metod, ki je priznan kot imunološki test.

Prisotnost okužbe z HCV v krvi pacienta je mogoče potrditi s pomočjo seroloških označevalcev, analiza, ki temelji na kompleksu strukturnih in nestrukturnih virusnih peptidov, pa omogoča pridobitev najbolj popolnih in zanesljivih podatkov o obstoju protiteles. Pri zdravih ljudeh so protitelesa proti virusu hepatitisa C v bolnikovi krvi odsotna, njihovo odkrivanje pa kaže na prisotnost patogena in razvoj patološkega procesa.

V teku študije so strokovnjaki identificirali skupna protitelesa IgM in IgG razreda, ki so neposredno povezana s strukturnimi in nestrukturnimi proteini HCV. Izvedba te študije nam omogoča, da v zgodnji fazi bolezni identificiramo bolnike, ki so okuženi z virusom hepatitisa C. Prisotnost celotnih protiteles v krvi bolnika kaže na pojav bolezni ali predhodno okužbo.

Pojav bolezni se kaže v prisotnosti protiteles razreda IgM, hepatitis tipa C pa je mogoče oceniti na podlagi zaznanih protiteles IgG razreda. Postanejo potrditev okrevanja (končna faza bolezni), za kar je značilno anatomsko in funkcionalno okrevanje prizadetih organov.

Pravočasno izvedena ELISA (ELISA) omogoča identifikacijo patološkega procesa v zgodnji fazi razvoja, diagnozo bolezni z visoko natančnostjo in povečanje možnosti za hitro okrevanje. Test ELISA omogoča ugotavljanje ne le prisotnosti virusa, temveč tudi števila specifičnih celokupnih protivirusnih protiteles.

Ženske v stanju nosečnosti, ko se prijavijo v nosečnico.
Bolniki, ki imajo simptome akutnega ali kroničnega hepatitisa.
Zdravstveni delavci, ki so nenehno v stiku z biološkimi materiali.
Bolniki z diagnozo aidsa.
Državljani, odvisni od drog.
Bolniki z alkoholizmom in tisti, ki vodijo asocialni način življenja.

Napotitev na test ELISA (encimski imunski preskus) in sprejemanje policistov ali zaposlenih v javnih službah. Potreba po testu ELISA se pojavi, če sumite na kršitev funkcionalnosti jeter ali ko prejmete vprašljive podatke o stanju organa po ultrazvoku. Zdravnik lahko bolniku da napotnico za preiskavo krvi ELISA, če je le-ta podvržena kompleksnemu kirurškemu posegu. Če ženska (zlasti starejša od 30 let) načrtuje nosečnost, in so v krvnem testu ugotovljene povišane vrednosti bilirubina ali transferaze (ALT, AST).

Specifična antivirusna protitelesa IgG so bila zaznana že več let. Njihova koncentracija se postopoma zmanjšuje, kar potrjuje pozitivno dinamiko. Kot pri kroničnem hepatitisu C se v tem primeru število skupnih anti-HCV protiteles ne spremeni. Natančna diagnoza temelji na določanju ravni protiteles IgM.

Potek hepatitisa C je odvisen od genotipa virusa, ki je povzročil razvoj bolezni. Znanih je 11 sodobnih vrst zdravil. V najtežjih situacijah je možna okužba z več genotipi virusa, ena izmed njih pa je vedno prevladujoča. Samo natančna diagnoza bo pomagala izbrati najučinkovitejša zdravila za učinkovito zdravljenje, izbrati njihovo odmerjanje in določiti trajanje terapevtskih posegov.

Vrednotenje rezultatov raziskav

Za diagnozo suma hepatitisa C in pridobitev indikativnih informacij o količini in kakovosti patogena opravimo encimsko imunsko testiranje (ELISA), v katerem strokovnjaki prejmejo potrditev prisotnosti virusa v telesu in lahko presodijo njegovo aktivnost.

S to študijo lahko sklepamo o:

virusna obremenitev;
tveganje za razvoj kroničnega procesa;
aktivnost razmnoževanja (replikacije) molekule HCV RNA;
trajanje patološkega procesa;
stopnjo poškodbe jeter.

Ocenjuje se tudi stopnja tveganja, da bo bolezen postala kronična. Identificirani z uporabo ELISA antivirusnih protiteles HCV kažejo na virusno replikacijo. Končni rezultati zahtevajo potrditev z natančnejšimi raziskavami.

Kvalitativna ocena rezultata encimskega imunskega testa je izražena kot pozitiven ali negativen rezultat. ELISA omogoča odkrivanje hepatitisa C v zgodnji fazi razvoja bolezni, kot tudi med potekom bolezni v anikterični obliki.

Analiza ima določene prednosti, vključno z:

Točnost kvalitativnih in kvantitativnih kazalnikov.
Minimalni čas študija.
Fazni test.

Enzimska imunska preiskava je ena od raziskav, ki jih odlikuje visoka natančnost, vendar kljub vsem prednostim v nekaterih primerih ne omogoča identifikacije patogena, ki je prisoten v človeškem telesu.

Laboratorij za raziskovanje odvzame pacientovo vensko kri in ga postavi v posebne posode. Po določenem času so antigeni (tuji mikroorganizmi) pritrjeni na stene posode. Specialist vstavi imunoglobuline (protitelesa) v posodo in išče imunski odziv.

Dobljene rezultate primerjamo s podatki posebej sestavljene tabele. Rezultat se oceni kot:

Pozitivna, kar kaže na prisotnost akutne oblike bolezni, če se v krvi ugotovi prisotnost protiteles razredov IgA, IgG, IgM.

Negativno - vse tri vrste protiteles niso bile odkrite, odsotne so.

Lažno pozitiven - rezultat ELISA je pozitiven, vendar ne potrjen po PCR (verižna reakcija s polimerazo).

Dvomljivi - označevalci v krvi se ne odkrijejo v prisotnosti hepatitisa C. To je mogoče s prezgodnjo diagnozo. Potrebna je ponavljajoča se analiza po 2-3 tednih. Za natančno diagnozo opravite analizo PCR.

Pri bolnikih, ki jemljejo zdravila, ki imajo zaviralni učinek na obrambni sistem telesa, je možen lažno negativen rezultat analize.

Tako lažno pozitivni kot lažno negativni rezultati analize so možni iz več razlogov. Prvič, to je minimalna virusna obremenitev v zelo zgodnji fazi razvoja bolezni. Enako pomembno je stanje bolnikovega imunskega sistema in individualne značilnosti njegovega telesa. Rezultati študije pomembno vplivajo na dajanje zdravil iz imunosupresivov.

Če je bolnica ženska v nosečnosti, je nemogoče popolnoma prepričana v točnost rezultata imunskega testa. Lažni rezultati so možni v primerih, ko se analiza izvaja za bolnike z avtoimunskimi boleznimi, onkološke bolezni z benignimi tumorji.

Dodatna raziskava se izvede, če je bolnik pred kratkim doživel hudo nalezljivo bolezen, diagnosticirana je bila presnovna motnja ali okvara endokrinega sistema. Če je sestava krvi povišana raven heparina ali znatno zmanjša raven elementov v sledovih.

Natančnost analize se lahko poveča z upoštevanjem obstoječih pravil za pripravo na njeno dostavo:

Krv dajemo samo na prazen želodec. Zadnji obrok je dovoljen vsaj 8-10 ur pred zbiranjem materiala.
Zvečer, pred analizo, je treba zavrniti jesti mastne, ocvrte, začinjene, prekajene izdelke in jedi.
Ne moremo govoriti o pitju alkohola.
Bolje je prenehati s kajenjem dan pred darovanjem krvi.

Enzimsko-imunski test se lahko izvede samo za tiste bolnike, ki trenutno nimajo kataralnih, vnetnih ali nalezljivih bolezni in se ne pritožujejo zaradi neprijetnosti.

Kršitev navedenih pravil in zahtev vodi do tega, da je rezultat analize ocenjen kot lažno pozitiven. To stanje se razvija v 15-20% primerov. Za popolno zaupanje pa zdravniki napotijo bolnike na dodatni pregled, med katerim morajo darovati kri za PCR.

Polimerazna verižna reakcija

Diagnoza ni mogoča le na podlagi rezultatov analize ELISA. Prisotnost protiteles ni dokaz o prisotnosti patogenega virusa v telesu v času študije. Napačno testiranje lahko povzroči živčni zlom ali še bolj akutno reakcijo bolnika. Diagnoza na podlagi rezultatov ELISA ni natančna. Potrebne so dodatne raziskave, katerih rezultati bodo prinesli dokončno razsodbo zdravnikov.

Pomembno je vedeti, da je lažno pozitiven rezultat testa možen pri ljudeh, ki trenutno trpijo zaradi drugih nalezljivih bolezni, vendar se njihov imunski sistem ni pravilno odzval na prodor patogenov ali virusov v telo.

Diagnosticiranje hepatitisa C omogoča številne laboratorijske teste, med katerimi je posebno mesto encimsko vezan imunski test (ELISA). Kvalitativna ocena kazalnikov je opredeljena kot pozitivni ali negativni rezultat. Odsotnost virusa hepatitisa B v krvi pacienta je norma, v nekaterih primerih pa strokovnjaki po raziskavi navajajo, da so v biološkem materialu ugotovljene neznatne koncentracije nekaterih fragmentov RNA (ribonukleinske kisline). Identificirajte jih z uporabo PCR (verižna reakcija s polimerazo).

Ta krvni test omogoča identifikacijo povzročitelja hepatitisa C v zgodnji fazi razvoja bolezni in postavitev diagnoze z visoko natančnostjo. Študija temelji na dejstvu, da imajo virusi v svoji strukturi molekule DNA (hepatitis B) ali RNA (hepatitis C).

Med analizo PCR s posebno obravnavo vzorcev krvi pacientov:

povečanje koncentracije molekul nukleinskih kislin;
določijo njihovo vrsto;
določiti vrsto patogena.

Če je v človeški krvi majhna količina fragmentov patogenih RNA, bodo vsi odkriti s PCR. To omogoča natančno diagnozo. Glavna razlika te analize od vseh drugih raziskovalnih metod je 100% natančna diagnoza.

Ta analiza se izvede v študiji krvi nosečnic, ki so se prijavile v nosečnico za registracijo, s sumom na hepatitis C z dolgim latentnim (latentnim) obdobjem, s težavo pri natančni diagnozi z uporabo ELISA. PCR je potreben v primerih, kjer je bil po encimskem imunskem testu dobljen dvomljiv rezultat.

Virus hepatitisa C v tem primeru je v bolnikovem telesu, vendar še ni izzval hitrega razvoja bolezni. To je latentni potek bolezni. Analiza poteka precej hitro, saj ni potrebe po gojenju patogena z uporabo hranilnega medija, da bi dobili rezultat. Glavna razlika med PCR in encimsko vezanim imunskim testom (ELISA) je v tem, da v tej študiji ne obstaja lažno pozitiven ali dvomljiv rezultat.