Jetra so osrednji laboratorij telesa. Sintetizira beljakovine (albumin, protrombin, fibrinogen, druge faktorje strjevanja krvi), nastajajo lipidi (holesterol), lipoproteini, žolčne kisline, bilirubin, žolč. Strupene snovi, ki se pojavijo v telesu in vstopijo v telo (antitoksična funkcija), se uporabljajo v jetrih. Jetra sintetizirajo glikogen in so vpleteni v trebušno slinavko pri uravnavanju zalog ogljikovih hidratov v telesu. Njegova aktivna vloga pri prebavi je, da žolč emulgira maščobe in izboljša njihovo razgradnjo s pankreatično lipazo. Izdelki za razdeljevanje hrane (maščobe, maščobne kisline, glicerin, aminokisline, ogljikovi hidrati, minerali, voda, vitamini) vstopajo skozi žile portalne vene v jetra. V njej so delno deponirani, delno predelani, uporabljeni in delno pripravljeni za uporabo v drugih tkivih.
Bolezni jeter povzročajo motnje ene ali druge funkcije, ki se uporablja v diagnostične namene. V kliničnih laboratorijih se najpogosteje izvajajo študije o motnjah funkcij pigmenta, ogljikovih hidratov, beljakovin. Pri akutnih vnetnih in toksičnih poškodbah jeter se iz jeter sprosti znatna količina znotrajceličnih encimov. Raziskave aldolaze, alanina in aspartnih transaminaz (aminoferaz), laktat-dehidrogenaze in njenih frakcij, holinesteraz, arginaze in drugih so imele diagnostično vrednost, kazalnike aktivnosti aldolaze in transaminaz pa za diagnosticiranje vnetnih bolezni jeter, zastrupitev, akutne distrofije vzorcev in tudi vzorcev. fosfataze, proizvedene v kostnem tkivu. Kazalniki njegove aktivnosti se uporabljajo pri diagnozi obstruktivne zlatenice. Študija encimskega spektra krvi se uporablja pri diferencialni diagnozi različnih bolezni jeter, zlasti zlatenice.
Spodaj so osnovne informacije o diagnostični vrednosti najbolj znanih vzorcev, ki odražajo stanje jeter v normalnih in patoloških stanjih. Metode nekaterih vzorcev ali načela njihove izvedbe so podane, če metode zahtevajo podroben opis. Biokemične metode za preučevanje delovanja jeter najdemo v naslednjih publikacijah: Smernice za uporabo standardiziranih kliničnih in laboratorijskih raziskovalnih metod.
Funkcionalni testi, ki odražajo vlogo jeter pri presnovi ogljikovih hidratov. Pri jetrnih boleznih je raven sladkorja v krvi na tešče pri večini bolnikov normalna - 4,44-6,11 mmol / l (80-110 mg%). Občasno pride do hiperglikemije, pogosto zaradi disfunkcije simpatoadrenalnega vegetativnega živčnega sistema. Pri cirozi jeter, ko je sinteza glikogena motena in so njene rezerve znatno izčrpane, se lahko pojavi hipoglikemija.
Vzorci za toleranco na ogljikove hidrate z obremenitvijo z glukozo se izvajajo na enak način kot pri proučevanju funkcije insularne aparature. Preskus se uporablja predvsem z eno samo obremenitvijo glukoze (sladkor, fruktoza, levuloza).
Galaktosurni test temelji na dejstvu, da je galaktoza težja od glukoze, spremeni se v glikogen, v primeru bolezni jeter pa se v večji količini izloči preko ledvic. S testom se v 200 ml vode doda 40 g galaktoze. Nato se urin zbere v treh ločenih obrokih vsake 2 uri, za 6 ur se sprosti 2-2,5 g galaktoze. Po A. I. Khazanov (1968) je pri kroničnem hepatitisu test pozitiven pri 4-12% bolnikov, v primeru jetrne ciroze pa pri 47,1% bolnikov.
Galaktosemične krivulje so bolj občutljive kot galaktosurni vzorec. Prazen želodec pri zdravi osebi vsebuje 0,1–0,9 mmol / L v krvi ali 2–17 mg% galaktoze. Po obremenitvi s 40 g galaktoze pri zdravi osebi opazimo močno povečanje ravni galaktoze na 6,6 mmol / l ali 120 mg% 30–60 minut, nato pa po 2–3 urah indikator zmanjšamo na 2,20 mmol / l, ali 40 mg%. Pri osebah z jetrno boleznijo je raven galaktoze višja, traja dlje in se po treh urah normalizira.
Funkcionalni testi, ki odražajo vlogo jeter pri presnovi lipidov. Jetra sodelujejo v vseh fazah presnove maščob. Za normalno absorpcijo maščob v črevesju je potreben žolč. Deluje kot detergent in emulgator za maščobo, olajša delovanje pankreatične lipaze, izboljša absorpcijo maščob v črevesju. V jetrih se fosfolipidi sintetizirajo v prisotnosti lipotropnih snovi, ki delujejo kot darovalci lipidnih skupin (metionin, holin) ali dejavnik, ki prispeva k sintezi fosfolipidov (vitamin B).12). Zaradi pomanjkanja lipotropnih snovi v jetrih se kopičijo nevtralne maščobe, količina glikogena pa se zmanjša. Ko jetrna bolezen v njej zmanjša vsebnost adenozin trifosfata, ki daje energijo za sintetične procese.
Raven holesterola v krvi je najpomembnejši pokazatelj sinteze lipidov v jetrih. Holesterol se zaužije s hrano. Njegova absorpcija v črevesju se pojavi z udeležbo žolčnih kislin. Vendar pa holesterol v hrani ni edini ali celo glavni vir holesterola v telesu. Nenehno se sintetizira v jetrih iz acetilkoenzima A. Sinteza holesterola presega njen vnos. Presežek sintetiziranega in prehranskega holesterola se iz telesa izloča skozi črevesje. Del nje se v jetrih pretvori v žolčne kisline in se uporablja tudi v drugih organih (nadledvične žleze, moda) kot izhodni material za sintezo steroidnih hormonov. Del holesterola se v jetrih kombinira z maščobnimi kislinami, da nastanejo estri holesterola.
Vsebnost holesterola v krvi določimo po metodi Ilka. Holesterol predhodno ekstrahiramo s kloroformom. V prisotnosti anhidrida ocetne kisline in zmesi ocetne in žveplove kisline daje raztopini zeleno barvo. Koncentracija holesterola se določi s kalorimetrično metodo na FEC. Pri zdravih ljudeh vsebuje serum 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) holesterola. Pri hepatitisu in cirozi jeter, je kršitev holesterola v krvi: hiperholesterolemija, očitno povezana s kršitvijo izločajoče funkcije jeter, manj pogosto - hipokolesterolemija, povezana z zmanjšanjem njene sinteze v jetrih.
Estri holesterola pri hepatitisu nastajajo v manjših količinah kot normalno, razmerje med estri in holesterolom pa se zmanjša na 0,3-0,4 namesto 0,5-0,7 pri zdravih.
Sinteza lipoproteinov v jetrih je prav tako zelo nizka in visoka gostota. Hilomikroni in majhen del lipoproteinov zelo nizke gostote se tvorijo v epitelnih celicah tankega črevesa. Sinteza in razgradnja lipoproteinov poteka s sodelovanjem lipoproteinske lipaze, ki je povezana s heparinom. Ugotovljeno je, da se v primeru jetrne ciroze zmanjša vsebnost heparina v krvi. Jetra tako sodelujejo pri tvorbi lipoproteinov in pri njihovem uničevanju. Pri bolezni jeter obstaja dislipoproteinemija, predvsem povečana tvorba lipoproteinov (hepatitis, začetne oblike jetrne ciroze). Beta-lipoproteini se zvišajo v krvi.
Študija lipoproteinov v krvi poteka predvsem z elektroforetsko metodo.
Presnova intersticijskega lipoproteina je poslabšana pri hudih boleznih jeter - jetrni komi, jetrni cirozi. V tem primeru se vsebnost mlečne (norma 0,78–1,2 mmol / l (7–14 mg%) in piruvična kislina (norma 57–136 µmol / l (0,5–1,2 mg%)) poveča v krvi..
Ko je jetrna koma zaznana povišana raven acetona v krvi.
Funkcionalni testi, ki odražajo vlogo jeter v presnovi beljakovin. Jetra preženejo aminokisline, jih oksidirajo v piruvično kislino v ciklu trikarboksilne kisline (Krebs) in sintezo beljakovin. Vsi albumini, 75–90% alfa globulinov, 50% beta globulinov se sintetizira v jetrih. Zdravo jetra lahko proizvede 13-18 g albumina na dan. Protrombin, prokonvertin, proakcelerin se sintetizira samo v jetrih. Sinteza beljakovin poteka s pomočjo energije. Eden od razlogov za zmanjšanje sintetične funkcije jeter je zmanjšanje vsebnosti mikroergičnih spojin v njem. Pri hudih boleznih jeter se lahko celotna količina beljakovin sirotke zniža na. 40 g / l namesto 80 g / l. Vsebnost albumina se znatno zmanjša (do 20 g / l namesto 40 g / l). Pri patoloških pogojih jetra tvorijo globuline z nenavadnimi lastnostmi (paraproteini). Znano je, da je takšen protein slabše obarvan z biuretnim reagentom, manj stabilen v raztopini soli (npr. Kalcijev klorid), v prisotnosti timola. S temi lastnostmi smo zgradili sedimentne diagnostične vzorce.
Celotne serumske beljakovine se določijo s polarimetrično metodo ali v reakciji z biuretnim reagentom. Norma - 60-80 g / l. Proteinske frakcije določimo z elektroforezo na papirju ali v akrilamidnem gelu. Vsebnost albumina v krvnem serumu je po V. E. Predtechensky 56,5–66,8%, alfarglobulin 3,0—5,6, alfagglobulin 6,9-10,5, beta-globulin 7,3 —12,5 in gama globulini - 12,8–19,0%. Pri boleznih jeter se zmanjša vsebnost albumina v krvi, povečanje vsebnosti gama globulinov. Pri akutnih vnetnih procesih (hepatitis) se raven alfa-globulinov poveča za 1,5-2 krat. Gama globuline proizvajajo limfociti in celice retikuloendotelijskega sistema. Pri kroničnem hepatitisu, ki se pojavlja z izrazitimi avtoimunskimi procesi, se vsebnost gama globulinov v krvi bistveno poveča (do 30%). A. I. Khazanov ugotavlja, da je pomembno povečanje beta ali gama globulin opazimo pri bolnikih z dekensirovano cirozo jeter in pogosto kaže na slabo prognozo bolezni. Odraža reorganizacijo sinteze beljakovin v jetrih in povečano tvorbo paraproteinov.
Sedimentni vzorci temeljijo na spremembah koloidne stabilnosti krvnega seruma pri interakciji z različnimi elektroliti. Stabilnost koloidnega krvnega sistema moti disproteinemija in paraproteinemija.
Sublimatni preskus (reakcija sublimat-sediment), Takat-Ara reakcija, je sestavljen iz dejstva, da se med medsebojnim delovanjem sublimata in natrijevega karbonata z beljakovinami krvnega seruma oborijo, pri čemer nastanejo kosmiči. Trenutno je reakcija uporabljena v modifikaciji Grinstedta (1948). V 0,5 ml nememoliziranega seruma, razredčenega z 1 ml fiziološke raztopine, dodamo 0,1% raztopino sublimatnih kapljic, dokler se ne pojavi trajna motnost, pri branju besedila v časopisu prek vertikalne plasti tekočine postane nemogoče. Stopnja je 1,6–2,2 ml 0,1-odstotne raztopine živega klorida. Test je pozitiven pri parenhimski poškodbi jeter, zlasti pri jetrni cirozi, akutnem in kroničnem hepatitisu, silikozi in silikotuberkulozi.
Veltmannov test (koagulacijski test, termokagulacijska reakcija) je bil predlagan leta 1930 za razlikovanje fibro-produktivnih in nekrotičnih procesov v jetrih. Svež serum brez sledov hemolize se vlije v 11 oštevilčenih 0,1 ml epruvete. Nato dodamo 5 ml raztopine kalcijevega klorida v padajočih koncentracijah: 0,1, 0,09, 0,08 itd., Na 0,01%, vsebino epruvete nežno stresamo in damo v vrelo vodno kopel 15 minut, nato pa rezultat je označen. Vzorec velja za pozitivnega v primeru obarjanja beljakovin. Število cevi s pozitivnim rezultatom se imenuje koagulacijski pas. Običajno je 6-7 cevi. Njegovo zmanjšanje (premik v levo) je opaženo pri vnetnih procesih v pljučih, tumorjih, miokardnem infarktu; podaljšanje (premik v desno) - pri vnetnih procesih v jetrih, akutni distrofiji jeter, cirozi, pa tudi hemolitični bolezni, nefrozi, fibrozni pljučni tuberkulozi. Trenutno je bil Veltmannov vzorec spremenjen na naslednji način: v 0,1 ml krvnega seruma dodamo 4,9 ml vode, nato dodamo 0,1 ml 0,5% raztopine kalcijevega klorida. Zmes segrejemo do vrelišča, v odsotnosti oborine vlijemo še 0,1 ml raztopine kalcijevega klorida. Postopek se ponavlja, dokler se v epruveti ne pojavi mišji protein. Rezultati so ovrednoteni na skupno količino kalcijevega klorida, porabljenega za reakcijo. Običajno je potrebno 0,4-0,5 ml kalcijevega klorida.
Thymol test (timolni test motnosti) pri modifikaciji Huerg in Popper (timol-toner test) temelji na tvorbi motnosti testnega seruma v prisotnosti nasičene raztopine timola v veronalnem pufru. Oborina nastane zaradi nastanka kompleksa globulin-timolofosfatid z zmanjšanjem vsebnosti albumina v krvi, povečanjem beta in gama globulinov. Stopnja motnosti je odvisna od temperature okolja in pH. Reakcijo ocenimo s fotokalorimetrično metodo pri 660 nm proti timol-meronalni raztopini. Izračun se izvede v skladu z umeritveno krivuljo, pripravljeno iz suspenzije barijevega sulfata. Običajno je serumska motnost 0–5 enot. M (Maklagana). Povečana motnost (pozitivni test) je opažena v pogojih poškodbe jeter pri epidemijskem hepatitisu (test je pozitiven pred razvojem zlatenice), v cirozi jeter, po akutnem hepatitisu itd.
Pri hudih kršitvah jeter je moten proces deaminacije aminokislin, kar vodi v povečanje njihove vsebnosti v krvi in urinu. Če je pri zdravih ljudeh vsebnost amino dušika v serumu 50-80 mg / l, potem se lahko s hudimi distrofičnimi procesi v jetrih poveča na 300 mg / l (300 mg / l ustreza 30 mg% razmerja prenosa amino dušika, izraženo v mg%, v mmol / l je 0,7139). A. I. Khazanov ugotavlja, da se pri akutnem virusnem hepatitisu zvišajo serumske vrednosti glutationa, glutaminske kisline, metionina, fenilalanina, serina in treonina. Pri kroničnem hepatitisu so se pojavile enake spremembe v vsebnosti aminokislin v krvi, vendar v manjši meri.
Čez dan se v urinu zdrave osebe izloči 100-400 mg (v povprečju 200 mg) aminokislin. Aminoazot je med njimi 1-2% skupnega dušika v urinu, pri boleznih jeter pa 5-10%. Pri akutni jetrni distrofiji so opazili povečano izločanje levcina in tirozina v urinu. Običajno se tirozin sprosti v količini 10-20 mg / l, pri akutnem virusnem hepatitisu - do 1000 mg / l (2 g na dan). V sedimentu urina lahko najdemo levcinske in tirozinske kristale.
Preostali dušik in sečnina v krvnem serumu se pri jetrnih boleznih povečata, če se razvije akutna hepatorenalna odpoved ali huda akutna poškodba jeter (akutna distrofija pri akutnem hepatitisu, poslabšanje kroničnega hepatitisa, jetrna ciroza, rak na jetrih po operaciji žolčnika in drugih). Pri zdravih ljudeh je preostali dušik v krvi 14,3–28,6 mmol / l (0,20–0,40 g / l), sečnina - 2,5–3,3 mmol / l (0,15—0, 20 g / l). Pri boleznih jeter se vsebnost preostalega dušika v krvi rahlo poveča - do 35,4–64,3 mmol / l (0,50 - 0,90 g / l). Zvišanje ravni nad 71,4 mmol / l (1,0 g / l) je opaženo pri poškodbah ledvic in znatno poslabša prognozo bolezni.
Preostali dušik v krvi določimo z več metodami - po mineralizaciji krvi z neposredno reakcijo z Nesslerjevim reagentom ali metodo Rappoport-Eichgorn-a. Ure v krvi določimo tudi z več metodami: ekspresna metoda temelji na uporabi reaktivnega papirja "Ureatest", uporablja se ureazna metoda s fenolnim hipokloridom, ureazna metoda z Nesslerjevim reagentom itd.
Jetra in hemostaza sta tesno povezana. V jetrih se sintetizirajo proteini, ki sodelujejo pri koagulaciji krvi. Najpomembnejši med njimi so protrombin in fibrinogen, kršitve sinteze teh proteinov pa so pogostejše. Treba je opozoriti, da se pri akutnih vnetnih boleznih pljuč, sklepov, jeter lahko vsebnost fibrinogena v krvi znatno poveča. Pri bolnikih z akutnim virusnim, toksičnim, kroničnim hepatitisom, cirozo jeter so opazili zmanjšanje vsebnosti protrombina v krvi. Najpomembnejši klinični znaki pomanjkanja protrombina so spontane krvavitve pod kožo, pod sluznico, krvavitev ustne votline, želodec.
Sinteza beljakovin, ki zagotavljajo proces strjevanja krvi, poteka ob sodelovanju vitamina K. Vitamin K je topen v maščobi in vstopa v telo skupaj z maščobami. Pri boleznih jeter, ki so posledica motenj nastanka žolča in izločanja žolča v telesu, pride do hipovitaminoze K.
Slaba sinteza faktorjev strjevanja krvi je lahko povezana z inhibicijo funkcije jeter, ki tvori beljakovine. V tem primeru se hipoprotrombinemija pojavi z zadostnim oskrbo telesa z vitaminom K. V kliniki za diagnostične namene se količina protrombina v krvi pregleda pred in po obremenitvi z Vikasolom.
V jetrih in pljučih se sintetizira velika količina heparina.
Vprašanje možnosti hemoragične diateze, ki je povezano s povečanjem proizvodnje antikoagulantnih faktorjev krvnega sistema pri boleznih jeter, ni dobro razumljeno.
Dejavnost faktorjev protrombinskega kompleksa (protrombi-nov indeks) preučujemo z metodo Quick (95–105% norma), koncentracijo fibrinogena v krvi preučujemo z Rutbergovo metodo (norma je 200–300 mg v 100 ml plazme). Po enotni gravimetrični metodi, ki jo priporoča V. V. Menshikov (1987), je stopnja fibrinogena v krvi 200–400 mg% ali 2–4 g / l. Metoda za določanje faktorjev strjevanja krvi je podrobno opisana v Priročniku kliničnih in laboratorijskih raziskovalnih metod.
Funkcionalni testi, ki odražajo vlogo jeter pri metabolizmu pigmentov. To je predvsem določanje bilirubina v serumu, študija urobilina, stercobilina, žolčnih pigmentov v urinu. Omenili smo že študijo vsebnosti bilirubina v žolču. Ti kazalniki neposredno ali posredno odražajo proces pretvorbe bilirubina v jetra. Jetra igrajo pomembno vlogo pri presnovi pigmentov, ki vsebujejo železo - hemoglobina, mioglobina, citokroma itd.
Začetna faza razgradnje hemoglobina je prekinitev metilnega mostu in nastajanje verdohemoglobina (verdoglobina), ki vsebuje tudi železo in globin. V prihodnosti bo Verdoglobin izgubil železo in globin, začel se bo proces razkrivanja porfirinovega obroča in nastanka biliverdina, pri katerem se bo oblikoval glavni žolčni pigment - bilirubin (posredni, nevezani bilirubin). Takšen bilirubin se kombinira z zdravilom Ehrlich diazoreaktivno po zdravljenju z alkoholom ali kofeinskim reagentom, kar daje indirektno barvno reakcijo. Hepatocite se aktivno absorbirajo in s pomočjo encimov glukuroniltransferaze v Golgijevem aparatu povežejo z eno (monoglukuronidno) ali dvema (diglucuronid) molekulama glukuronske kisline. Petnajst odstotkov bilirubina v jetrih s sulfatno transferazo z žveplovo kislino in fosfoadenozin fosfosulfata. Takšen bilirubin hitro reagira z diazoreaktivnim in daje neposredno reakcijo.
Pri jetrnih boleznih je zvišana vsebnost bilirubina v krvi v glavnem odvisna od dejstva, da jo hepatociti izločajo v žolča in krvne kapilare. Bilirubin se kopiči v krvi, kar povzroči neposredno reakcijo z diazoreaktivnim (neposrednim ali vezanim bilirubinom). Manjša količina vsebuje tudi bilirubin v primeru hude poškodbe jeter, kar povzroči posredno reakcijo, ki jo povzroči zmanjšanje aktivnosti zajemanja nekonjugiranega bilirubina iz krvi v jetrnih celicah in je očitno posledica kršitve mehanizma zajemanja bilirubina in absorpcije v lupinah hepatocitov.
Ko obstrukcijo skupnega žolča ali jetrnega kanala s kamnom, tumorjem, viskozno sluz, zožitev lumna z brazgotinami (na primer, po operaciji na žolčnem traktu) v jetrnih žolčnih kanalih povečuje pritisk žolča. Prodre v krvne in limfne kapilare. V krvi se nabira predvsem bilirubin, ki daje neposredno reakcijo z diazoreaktivnim (subhepatična ali mehanska, zlatenica).
Hemolizo eritrocitov spremlja sproščanje velike količine hemoglobina, del se izloča skozi ledvice, nekatere ujamejo celice retikuloendotelijskega sistema in se pretvorijo v verdoglobin in bilirubin. Del takega bilirubina je konjugiran z glukoronsko kislino v jetrih in se izloča z zvišano količino žolča v črevesje. Vendar pa se v krvi zadrži precejšnja količina bilirubina, ki povzroči posredno reakcijo. Takšna zlatenica se imenuje hemolitična ali nadhepatična.
Z obstruktivno zlatenico zelo malo žolča (bilirubina) vstopi v črevesje ali pa sploh ne vstopi. Barva blata je odvisna od produktov pretvorbe bilirubina - stercobilina, ki nastane v črevesju iz stercobilinogena - vmesnega produkta pretvorbe bilirubina. Če žolčnih barvil ne vstopijo v črevesje, iztrebki postanejo lahki, beli, akolični. Reakcija na stercobilin in urobilin je v takih primerih negativna.
Pri parenhimski zlatenici žolčni pigmenti vstopajo v črevo v manjših količinah, kot je običajno, saj se vsebnost bilirubina v žolču zmanjšuje in količina žolča je majhna. Toda bilirubin, ki vstopa v črevo, je dovolj, da se blato obarva v svetlo rjavi barvi. Del stercobilina se absorbira in izloča skozi ledvice, najprej v obliki urobilinogena in nato urobilina. Ko je konjugirani (direktni) bilirubin v krvi prekomeren, ga delno vstopi v urin, kjer ga lahko odkrijejo rozga (z alkoholno raztopino joda) ali vzorec z obarjanjem bilirubina s pomočjo barijevih soli.
Pri hemolitični zlatenici iz žolča se poveča raven bilirubina. Prekomerno se tvorita tudi sterobilin in urobilin - iztrebki in urin so intenzivno obarvani. V krvi se poveča vsebnost nevezanega bilirubina, slabo topna v vodi, ne prodre skozi ledvično pregrado v tkivo. Zato v urinu ni bilirubina.
Serumski bilirubin določamo po metodi Endrašík, Cleghorn in Grof. Ta metoda temelji na kombinaciji diazofenil sulfonske kisline (nastale z medsebojnim delovanjem sulfanilne kisline z natrijevim nitritom) s serumskim bilirubinom, kar povzroči rožnato-vijolično obarvanje. Intenzivnost njegovega presoja o koncentraciji bilirubina, ki se je začela v neposredni reakciji. Ko se kofeinski reagent doda serumu, nekonjugirani (posredni) bilirubin preide v topno disociirano stanje in diazoreaktivni mešanici doda raztopino, obarvano v rožnato-vijolično barvo. Tehnika je opisana v referenčni knjigi V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov; Priročnik ed. A. A. Pokrovsky; metodična navodila, izd. V. V. Menshikov in drugi.
Vrednost nekaterih encimov pri diagnozi jetrnih bolezni. Enzimi jeter, kot drugi organi, so razdeljeni na organsko specifične in nespecifične. Za jetra so organsko specifični encimi ornitin karbamil transferaza, glutamat dehidrogenaza, fosfofruktaldolaza, histidaza, sorbitol dehidrogenaza. Poleg tega se šteje, da je peti izoencim laktat dehidrogenaza specifičen.
Jetrne celice so bogate z encimi. Poškodbe hepatocitov privedejo do sproščanja znatne količine znotrajceličnih encimov in njihovega kopičenja v krvi. V zvezi s tem so transaminaze, aldolaze in encimi v celicah drugih organov in tkiv pridobili diagnostično vrednost. Oceniti njihovo aktivnost v krvi je treba primerjati s kliničnimi znaki bolezni.
Aldolaza - skupinsko ime encimov, vključenih v mehanizme aerobne delitve ogljikovih hidratov. Serumska aldolaza katalizira povratno cepitev fruktoze-1,6-difosfata v dva fosfo-trioza - fosfogliceraldehid in dioksiaceton monofosfat. Aktivnost aldolaze v serumu se poveča pri akutnem epidemičnem hepatitisu in v manjši meri pri akutnem toksičnem hepatitisu. Pri akutnem virusnem hepatitisu je pri 90% bolnikov opaženo 5-20-kratno povečanje aktivnosti fruktozne difosfat aldolaze. Njegovo povečanje se pojavi 3-15 dni pred pojavom drugih kliničnih znakov bolezni. Po 5 dneh od začetka zlatenice se aktivnost aldolaze zmanjša. V primeru anikteričnih oblik akutnega hepatitisa so opazili tudi povečanje aktivnosti aldolaze. Pri bolnikih s kroničnimi vnetnimi procesi v jetrih se aktivnost aldolaze rahlo poveča in v majhnem številu.
Študija aktivnosti aldolaze v serumu poteka po metodi V.I. Tovarnitsky, E.N. Voluyskaya. Pri zdravih ljudeh aktivnost tega encima ne presega 3-8 enot.
Aminotransferaze (transaminaze) se pogosto uporabljajo za diagnosticiranje vnetnih bolezni jeter. Aminotransferaze v človeškem telesu izvajajo postopke transaminacije (povratni prenos amino skupin aminokislin v keto kisline). Najpomembnejša je raziskava aktivnosti aspartat aminotransferaze (AST) in alanin aminotransferaze (ALT). Ti encimi so široko razširjeni v različnih organih in tkivih - jetra, miokard, skeletne mišice, ledvice itd. Povečanje aktivnosti aminotransferaz pridobi diagnostično vrednost v primerjavi s kliničnimi znaki bolezni.
Študija se izvaja po metodi Reitman in Fraenkel. Norma za AST je 0,1–0,4 mmol / (h • l) (8–40 enot), za AlT pa 0,1–0,68 mmol / (h • l) (5–30 enot).. Trenutno je količina substrata v molih, kataliziranih z 1 l preskusne tekočine na 1 uro inkubacije pri 37 ° C (mmol / (h • l)), enota encimske aktivnosti, enote predhodno sprejete encimske aktivnosti pa se pretvorijo v označene z uporabo naslednjih formul: za AsT - D / 88, za AlT - D2 / 88, kjer je D indikator encimske aktivnosti, izražen v stari dimenziji (enotah), je 88 pretvorbeni faktor, numerično enak molekulski masi piruvične kisline.
Pri epidemičnem hepatitisu se aktivnost aminotransferaz poveča z veliko konsistenco in v zgodnjih fazah, celo pred pojavom zlatenice. Pri toksičnem hepatitisu in poslabšanju kronične aktivnosti aminotransferaz se povečuje 3-5 krat. Spremembe jetrne ciroze niso tako redne.
Laktat dehidrogenaza (LDH) je glikolitični encim, ki reverzibilno katalizira oksidacijo 1-laktata v piruvično kislino. Za LDH je potreben nikotinamidni dinukleotid kot vmesni akceptor vodika. V serumu smo odkrili pet izoencimov LDH. LDH, ki ga najdemo v miokardu, LDH5 - v jetrih. Peto frakcijo encima inhibira urea in ta lastnost encima olajša njeno določanje.
Serumski LDH določamo z metodo Sevel in Tovarek. Normalne vrednosti skupne serumske LDH aktivnosti so 0,8–4,0 mmol piruvične kisline na liter seruma na 1 uro inkubacije pri 37 ° C. Urea-LDH predstavlja 54-75% celotnega LDH.
Uporablja se tudi v kliničnih laboratorijih za določanje LDH po metodi elektroforeze krvnega seruma v poliakrilamidnem gelu. Metodo določanja LDH najdemo v referenčni knjigi V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov. Pri virusnem hepatitisu se aktivnost LDH4 in LDH5 poveča v prvih 10 dneh pri vseh bolnikih, stopnja njegovega povečanja pa je odvisna od resnosti bolezni.
Holinesteraze so v eritrocitih (acetilholinesteraza) in v serumu (acil hidrolaza acilholin). Oba encima cepita holinske estre s holinom in ustreznimi kislinami in se odlikujeta po svoji specifičnosti. Acetilholinesteraza hidrolizira samo acetilholin (prej imenovan pravi holinesteraza). Serumska holinesteraza se lahko razgradi skupaj z acetilholinom in butirilholinom (in 2-krat hitreje kot acetilholin). Zato je znana tudi kot butirilholinesteraza ali lažno serumska holinesteraza. Sintetizira se v jetrih, njegova aktivnost pa se uporablja kot znak funkcionalne sposobnosti jeter.
Aktivnost serumske holinesteraze je določena s stopnjo hidrolize acetilholin klorida v ocetno kislino in holin. Količina sproščene ocetne kisline se določi s spremembo barve pufrske raztopine v prisotnosti indikatorja kislosti na FEC. Standard je 160–340 mmol / (h • l). V primeru bolezni jeter (hepatitis, ciroza) se sinteza serumske holinesteraze zmanjša. Pri bolnikih z obstruktivno zlatenico se zmanjša aktivnost holinesteraze le, če se pojavijo znaki hude poškodbe jeter. Pri hipoproteinemiji, kaheksiji, zastrupitvi s organofosfatnimi strupi, mišičnimi relaksanti se zmanjša njegova aktivnost. V nekaterih primerih (hipertenzija, fibroidi maternice, peptični ulkus itd.) Opazimo povečanje aktivnosti holinesteraze.
Gama-glutamiltranspeptidaza (G-GTP) razgradi kromogeni substrat gama-glutamil-4-nitronilid in olajša prenos gama-glutamilnega ostanka na akceptorski dipeptid glicilglicin. Sproščeni 4-nitroanilin določimo s foto kalorimetrično metodo pri 410 nm po zaustavitvi encimske reakcije z ocetno kislino.
GGTG najdemo v vseh človeških organih in tkivih. Aktivnost tega encima v ledvicah, jetrih, trebušni slinavki, vranici, možganih je najvišja (približno 220 mmol / h • l), v drugih organih (srce, skeletne mišice, pljuča, črevesje) - veliko nižja (0,1–18 mmol / h). Najvišja aktivnost G-GTP je pri žolču in urinu, njena serumska aktivnost pa je 4-6 krat manjša kot v urinu, pri rdečih krvnih celicah pa je odsoten G-GTP aktivnost v serumu zdravih moških. 0,9–6,3 mmol / (h • l), pri ženskah - 0,6–3,96 mmol / (h • l). G-GTP aktivnost se poveča pri jetrni cirozi pri 90% bolnikov z t Vladne, pri kroničnem hepatitisu - 75% pri kronični cholangiohepatitis -. Skoraj vsi pacienti encim etanol Določitev T-GTP je občutljiv test pri diagnosticiranju bolezni jeter alkohol toksični..
Alkalna fosfataza je ena izmed hidrolaz, ki fermentirajo organske spojine, fosforne estre z izločitvijo ostankov. Aktivna je v mediju s pH 8,6–10,1 in se močno aktivira pod vplivom magnezijevih ionov. Alkalna fosfataza najdemo v vseh človeških tkivih in organih. Še posebej veliko v kostnem tkivu, parenhimu jeter, ledvicah, prostati, drugih žlezah, črevesni sluznici. Vsebnost alkalne fosfataze pri otrocih je 1,5-3 krat višja kot pri odraslih.
V agar gelu smo elektroforezo uporabili za izolacijo petih izoencimov alkalne fosfataze. Prva je specifična za jetra, druga za kostno tkivo, peta za žolčnik. Encim se izloči iz jeter z žolčem.
Aktivnost alkalne fosfataze zaznavamo z uporabo natrijevega beta-glicerofosfata, ki se hidrolizira z sproščanjem anorganskega fosforja. Slednje je merilo encimske aktivnosti. Encim določimo v serumu po Bodanskyjevi metodi. Običajno je aktivnost alkalne fosfataze 0,5-1,3 mmol anorganskega fosforja na 1 liter seruma za 1 uro inkubacije pri 37 ° C.
Povečanje aktivnosti alkalne fosfataze poteka predvsem v dveh stadijih: bolezni kosti s proliferacijo osteoblasta in bolezni, ki vključujejo holestazo. Pri naslednjih boleznih kosti so opazili povečano aktivnost alkalne fosfataze: hiperparatiroidizem (Recklinghausenova bolezen), sarkom kosti, deformirajočo osteozo ali fibrozno osteodistrofijo (Pagetovo bolezen) in druge oblike osteoporoze. kamen, tumor, bezgavke pri raku žolčnika, želodec, pri osebah z vnetnimi boleznimi jeter in žolčevodov, trebušne slinavke, limfogranulomatoze itd. Stalno povečevanje aktivnosti alkalne fosfataze opazili pri tumorjih jeter, kroničnega hepatitisa in ciroze, akutnega hepatitisa, zlatenica tako brez in z zlatenico. Aktivnost encima se poveča, če se vključi mehanska komponenta zlatenice (holangitis, kompresija skupnega jetrnega kanala z regionalnimi bezgavkami, vozlišča regenerativnih jeter na območju vrat). Tako povečanje aktivnosti alkalne fosfataze v krvi bolnikov z zlatenico kaže na njeno mehansko naravo.
Preskus delovanja jeter
Pri porazu jeter niso motene vse njegove funkcije, ne istočasno in ne enako. Poleg tega ima jetra pomembne rezerve: dovolj, da se 20% delovanja jetrnega parenhima shrani za ohranjanje telesne aktivnosti. Regenerativna sposobnost jeter je prav tako velika. Zato lahko določeno zmanjšanje funkcionalnosti jeter ne vpliva na stanje pacienta, saj jetra tudi v teh razmerah zagotavlja potrebno raven vitalnih procesov.
Bistvo večine funkcijskih testov (ne le jeter, ampak tudi drugih organov) je, da je testni organ tako zahteven, da oboleli organ ne more z njimi obvladati (metoda obremenitve). Med vzorci, s katerimi se pregledajo jetrne funkcije, nekateri odsevajo specifično aktivnost tega organa, na primer pigmentne, nevtralizacijske, proteinske funkcije; drugi vzorci le delno razkrivajo delovanje jeter, saj njegovo sodelovanje pri tej vrsti presnove ni izolirano, ampak je povezano z vlogo drugih organov. Sem spadajo na primer vzorci, ki preučujejo presnovo ogljikovih hidratov, vode, maščob.
Sl. 117. Shema izolacije bilirubina v normi (/) in v različnih vrstah zlatenice: hemolitični (2), parenhimski (J) in mehanski <4).
Študija metabolizma pigmentov Odraz pigmentne presnove v jetrih je vsebnost bilirubina v krvi (kot tudi v blatu in urinu) in produktih njegove predelave. Identifikacija motenj metabolizma pigmentov daje idejo o funkcionalnem stanju hepatocitov in pomaga razlikovati med različnimi vrstami zlatenice.
Nastanek bilirubina se pojavi v retikuloendotelnih celicah kostnega mozga, bezgavk, predvsem vranice, pa tudi v stelatnih retikuloendotelnih celicah jeter (sl. 117). Bilirubin nastane iz hemoglobina, ki se sprosti med fiziološko razgradnjo rdečih krvnih celic; hkrati se hemoglobin razgradi v beljakovinsko telo globina in železa, ki vsebuje heme. V celicah retikuloendotelijskega sistema se prosti bilirubin tvori iz sproščenega hema, ki kroži v krvi v nestabilnem razmerju z beljakovino albumina. Vsebnost prostega bilirubina v krvi je 8.55-20.52 μmol / l (0.5-1.2 mg%). Večina je v jetrih, kjer se sprošča iz povezave z albuminom in se s sodelovanjem jetrnih encimov združuje z glukuronsko kislino, da tvori vodotopno spojino, bily-rubinglukuronid (mono- in diglukuronid ali vezani bilirubin), ki se izloči v žolčevod.
Zato jetra sodelujejo pri izmenjavi bilirubina in opravljajo naslednje funkcije: 1) tvorba bilirubina v stelatnih retikuloendotelnih celicah; 2) ujetje prostega bilirubina iz krvi; 3) tvorbo spojine bilirubina z glukuronsko kislino; 4) bilirubing izločanje glukuronida v žolč (vezani bilirubin).
V začetku XX. Van den Berg je opazil drugačno interakcijo seruma bolnikov z zlatenico s sulfodiazoreaktivom z zlatenico različnih etiologij. Medtem ko je serum bolnika z obstruktivno zlatenico takoj po dodajanju diazoreaktivnega sredstva takoj postal rdeč, se je ta sprememba barve seruma bolnika s hemolitično zlatenico pojavila šele po dodatku alkohola. Reakcija v prvem primeru je bila imenovana neposredna, v drugem pa posredna. Izkazalo se je, da posredni odziv daje prosti bilirubin, in neposredna reakcija z bilirubiranjem glukuronida (konjugiranega, tj. Vezanega bilirubina). Glede na dodajanje ene ali dveh molekul glukuronske kisline molekuli bilirubina se tvori mono- ali diglukuronid bilirubin.
V krvi zdravih ljudi je samo prosti pigment. Pri boleznih, ki jih spremlja kršenje ali izkrivljanje normalnega izločanja bilirubina, ki je povezan z žolčem, vstopi v krvni obtok, nato pa oba pigmenta krožita (lahko ju določimo ločeno).
Kvalitativni vzorec Van den Berg daje indikativne informacije: če se izkaže, da je posreden, lahko domnevamo, da je v krvi le prosti bilirubin; če se izkaže, da je neposreden, potem ni znano, v kakšnem razmerju sta oba pigmenta - pozitivna neposredna reakcija maskira prisotnost katere koli količine prostega bilirubina. Trenutno v glavnem uporabljajo ločeno kvantitativno določanje frakcij bilirubina. V večini študij, izvedenih v ta namen, se uporabljajo isti diazo reagenti kot za kvalitativni vzorec (diazo reagent I: 5 g sulfanilne kisline in 15 ml močne klorovodikove kisline raztopimo v destilirani vodi in prostornino naravnamo na 1 l z destilirano vodo; diazoreakt II: 0,5% raztopina natrijevega nitrita, diazo mešanica: 10 ml diazoreaktivnega I + 0,25 ml diazoreaktivnega II).
Kvalitativni test: 0,5 ml seruma vlijemo 0,25 ml diazo mešanice. V primeru rdečice v serumu v manj kot 1 minuti se šteje, da je reakcija direktna in kaže prisotnost serumsko vezanega bilirubina. Če se rdečica pojavi počasi (v 1–10 min), ki se pojavi, ko je relativno prosti vezani bilirubin vezan na prosto, se reakcija šteje za neposredno odloženo. Če rdečica ni več kot 10 minut, je neposredna reakcija negativna. Če želite zagotoviti, da je rumena barva takšnega seruma odvisna od bilirubina, ji dodajte dvojno količino alkohola, filtriramo in diazo-zmes dodamo filtratu, zaradi česar tekočina postane rožnata (posredna reakcija). Obstaja veliko metod za kvantitativno določanje frakcij bilirubina. Nekateri od njih temeljijo na dejstvu, da na prosti bilirubin vplivajo snovi, kot so kofein, ki se uporablja v najpogostejši metodi Endrashik, metilni alkohol itd., Ki deluje kot katalizator, pospeševalnik, pridobi sposobnost reagiranja z diazoreaktantom. V prvem delu seruma, obdelanega s pospeševalnikom, je mogoče določiti skupno vsebnost obeh frakcij. V drugem delu, brez dodajanja pospeševalnika, se določi samo vezani pigment. Če odštejejo njegovo vezano frakcijo od celotne količine bilirubina, bodo prepoznali prosto frakcijo. Druge metode za ločeno določanje frakcij bilirubina (kemijske, kromatografske) so bolj zapletene.
Prosti bilirubin, netopen v vodi, se ne izloča preko ledvic; po vezavi z glukuronsko kislino postane topen v vodi, ko se nabere v krvi - s subhepatično in jetrno žolčo, se zazna v urinu. V žolčnem traktu se sprosti le vezani bilirubin (bilirubinglukuronid). V velikih žolčevodih in žolčniku (zlasti med vnetnimi procesi v njih) in še naprej v črevesju se manjši del bilirubina vrne v urobilinogen, ki se resorbira v zgornjem tankem črevesu in vstopi v jetra s krvjo portalne vene. Zdravo jetra jo popolnoma ujame in oksidira, vendar bolni organ ne more opraviti te funkcije, urobilinogen prehaja v kri in se izloča z urinom kot urobilin. Urobilinurija je zelo subtilen in zgodnji znak odpovedi jeter. Ostalo, večina bilirubina v črevesju je obnovljena do stercobilinogena. Glavni del se izloča v blatu, spremeni v rektum in iz nje (v svetlobi in zraku) v stercobilin, kar daje iztrebku normalno barvo. Majhen del sterkobilinogena, ki se absorbira v spodnjih delih debelega črevesa, skozi hemoroidne vene, mimo jeter, vstopi v splošno cirkulacijo in se izloči skozi ledvice. Normalni urin vedno vsebuje sledi stercobilinogena, ki se pod vplivom svetlobe in zraka spremeni v sterkobilin.
Večina reakcij, ki odkrivajo produkte za zmanjšanje bilirubina v urinu, daje podobne rezultate tako z urobilinom kot s stercobilinom, čeprav se ti dve snovi razlikujeta tako po kemijski strukturi kot po fizikalnih lastnostih. Metode za njihovo ločitev so relativno kompleksne. Zato se v laboratorijski praksi odprejo skupaj in označijo kot urobilinoidi (telesi urobilina).
Vsebnost teles urobilina v urinu se povečuje ne le, če je jetrna funkcija nezadostna, temveč tudi pri povečanju hemolize. V teh primerih se zaradi sproščanja znatne količine hemoglobina tvori več bilirubina in izloči v črevesje. Povečana proizvodnja sterko-bilina vodi v povečano izločanje z urinom. V primeru obstruktivne zlatenice, ko žolč sploh ne vstopi v črevesje, v fecesu ni sterkobilina, v urinu ni teles urobilina. Ko se hepatocelularna zlatenica zmanjša, se izločanje bilirubina v žolč in količina stercobilina v blatu zmanjša, število urobilinskih teles v urinu pa se poveča. Njihovo razmerje, ki znaša 10: 1–20: 1, se pri hudih poškodbah jeter bistveno zmanjša in doseže 1: 1, pri hemolitičnih zlatenicah pa povečanje iztrebkov stercobilina bistveno presega povečanje izločanja uroilinskih organov z urinom. Njihovo razmerje se poveča na 300: 1–500: 1. Razmerje med proizvodi za obnovitev bilirubina v blatu in urinu je veliko bolj pomembno pri razlikovanju med zlatenicami kot absolutna vrednost vsake od njih.
Študija presnove ogljikovih hidratov. V jetrnih celicah s sodelovanjem encimskih sistemov pride do sinteze glikogena, njegovega odlaganja in glikogenolize ter glikoneogeneze. Vzdrževanje glukoze v krvi je poleg jeter zagotovljeno tudi z delovanjem drugih organov in sistemov - trebušne slinavke, hipofize-nadledvične žleze itd. S tem v zvezi se glukoza v krvi na tešče spremeni le z zelo hudo okvaro jeter in razkriva njeno nezadostno sodelovanje pri ogljikovih hidratih. izmenjava je možna le s pomočjo funkcionalnih vzorcev.
Preizkus obremenitve z glukozo je neučinkovit, saj na vsebnost slednjega v krvi poleg že omenjenih organov vpliva tudi stanje vegetativnega živčnega sistema, zaloge glikogena v jetrih in mišicah itd.
Test z obremenitvijo galaktoze je znane vrednosti (galaktoza se ne absorbira v tkivih in organih, razen v jetrih in hormoni ne vplivajo na njegovo vsebnost v krvi). Bolniku je dovoljeno piti raztopino 40 g galaktoze v 200 ml vode in določiti njeno izločanje z urinom. Običajno ne traja več kot 4 ure in ne presega 3 g. Delovanje ledvic in črevesna absorpcija lahko vplivata na izločanje galaktoze v urinu, zato je določitev vsebnosti galaktoze v krvi pomembnejša. Pri dobrem delovanju jeter je največji porast vsebnosti galaktoze v krvi opazen po 30–60 minutah in ne presega 15% začetne ravni; slednji se ponovno doseže po 2 urah, pri slabi funkciji jeter pa je zvišanje ravni galaktoze višje, zmanjšanje ravni galaktoze v krvi pa se pojavi počasneje.
Proučevanje presnove beljakovin Vloga jeter v presnovi beljakovin je zelo visoka: v njej se sintetizirajo in deponirajo beljakovine, v krvni obtok vstopajo aminokisline, prehrambeni polipeptidi in produkti razgradnje tkivnih proteinov.
Tu se katabolizirajo, nevtralizirajo in odstranjujejo neuporabljene razgradne produkte. Nekatere aminokisline so podvržene deaminaciji in transaminaciji. Osvobojeni amoniak se v jetrih pretvori v manj strupeno sečnino, od aminokislin, ki jih pripeljejo zunaj in sintetizirajo v jetrih, pa znova zgradi lastne tkivne proteine in krvne beljakovine; albumin, globulini (a in p, do neke mere, y), fibrinogen, protrombin, heparin, nekateri encimi. V jetrih nastajajo spojine beljakovin z lipidi (lipoproteini) in ogljikovi hidrati (glikoproteini).
Kršenje funkcije tvorjenja beljakovin v jetrih se ugotovi s pregledom beljakovin krvne plazme ali seruma. Ta kršitev ne vpliva toliko na celotno količino beljakovin, kot je razmerje med njihovimi frakcijami, pri katerih se pri večini jetrnih lezij opazi sprememba - disproteinemija.
Metoda elektroforeze na papirju, ki je trenutno najbolj razširjena v klinični praksi, temelji na dejstvu, da so različni proteini v električnem polju odvisni od velikosti, oblike molekule, njenega naboja in drugih faktorjev pri različnih hitrostih proti pozitivni elektrodi. Med elektroforezo na papirju se različne proteinske frakcije koncentrirajo v različnih delih papirnega traku, kjer jih lahko identificiramo z ustrezno barvo. Velikost frakcij je določena z intenzivnostjo barve vsakega od njih. Plazemske beljakovine so razdeljene na pet glavnih frakcij - albumin; a, - in2-, (5-, kot tudi y-globulini (tabela 4).) Elektroforeza v drugih medijih (agar, škrobni gel itd.) Vam omogoča razdelitev beljakovin v večje število frakcij.
Pri jetrnih boleznih je zmanjšanje razmerja albumin-globulin (A / G) najpogostejše, predvsem zaradi zmanjšanja
Tabela 4. Normalni proteinogram
Zdravje, medicina, zdrav način življenja
Kvantitativni test delovanja jeter
Za kronične bolezni jeter je značilno dolgo latentno obdobje z minimalnimi nespecifičnimi kliničnimi simptomi (kompenzacijska faza). V terminalni fazi bolezni se razvije ascites, zlatenica, encefalopatija in prekoma (stopnja dekompenzacije). Raven albumina in protrombina v serumu omogoča ovrednotenje sintetične funkcije jeter, ki v večini primerov ostane normalna že dolgo časa. Kvantitativna študija delovanja jeter v zgodnjih fazah dinamike omogoča spremljanje učinkovitosti zdravljenja in ocenjevanje prognoze, vendar nima diagnostične vrednosti.
Obremenitveni test galaktoza
Galaktoza je neškodljiva snov. Lahko ga dajemo intravensko v odmerku, ki zadostuje za nasičenje encimskega sistema, ki je odgovoren za njegovo odstranitev. Hitrost izločanja galaktoze je odvisna od njene fosforilacije s galaktokinazo. V tem primeru je treba upoštevati del apliciranega odmerka, ki se izloči z ekstrahepatično potjo. Ta test precej natančno odraža funkcijo jetrnih celic, vendar zahteva ponavljajočo določitev ravni galaktoze za 2 uri.
Tabela2-2. Kvantitativni test delovanja jeter
Mikrosomi (sistem citokroma P450)
Glikoprotein s terminalnim ostankom galaktoze
* Pri majhnih odmerkih, vam omogoča, da ocenite krvni pretok v jetrih.
Preskusi dihanja
Aminopirin se z N-demetiliranjem transformira s citokromom P450 (ki se nahaja v mikrosomskem delu hepatocitov) v ogljikov dioksid. Ta snov v svojih lastnostih ustreza zahtevam za dihalne teste pri preučevanju delovanja jeter. Aminopirin je označen z 14C radioaktivnim izotopom in apliciran oralno. Vzorci izdihanega zraka se zbirajo v dvournih intervalih. Koncentracija 14 ° C v izdihanem CO2 s stopnjo zmanjšanja radioaktivnosti v plazmi. Vzorec odraža preostalo maso delujočih mikrosomov in živih tkiv jeter. Rezultati, dobljeni pri poskusih na podganah z modelom ciroze jeter, kažejo, da se zmanjšanje N-demetilacije pojavi zaradi izgube delujoče mase hepatocitov; hkrati ostane funkcionalna aktivnost na hepatocit nespremenjena. Študija ima prognostično vrednost in vam omogoča spremljanje učinkovitosti zdravljenja (njegova vloga pri diagnozi je majhna). Test aminopirina se lahko uporabi za preučevanje učinka zdravil na delovanje jetrnih mikrosomskih encimov.
Označeno 14 Z kofeinom in fenacetinom se lahko uporablja tudi pri izvajanju dihalnih testov. Vzorec z obremenitvijo s 14 C-galaktozo omogoča vrednotenje encimov, lokaliziranih v citosolu. Vsi respiratorni testi so zapleteni in dragi, zato je malo verjetno, da se bodo v prihodnosti pogosto uporabljali.
Odstranjevanje kofeina s slinavkami
Kofein (1,3,7-trimetilksantin) se skoraj popolnoma presnovi z N-demetilacijo v mikrosomskem sistemu jeter (citokrom P448). Metilksantini se izločajo z urinom. Stopnjo kofeina v serumu in žlezah slinavke lahko preučimo z encimskim imunskim preskusom. Hitrost izločanja kofeina s sline čez noč se dobro ujema z njegovim očistkom, kot tudi z rezultati dihalnega testa z aminopirijem. Študija izločanja kofeina iz žlez slinavk je preprost način za oceno motenj delovanja jeter. Različni dejavniki lahko vplivajo na očistek kofeina: kajenje pospešuje presnovo kofeina z indukcijo encimov, nekatera zdravila, kot je cimetidin, zavirajo razgradnjo kofeina; kofein se s starostjo zmanjša. Pri večkratnem določanju očistka kofeina pri istem bolniku mora biti odmerek kofeina enak, saj je njegov očistek odvisen od odmerka.
Test z lidokainom
Lidokain se presnavlja z oksidativno N-deetilacijo s citokromom P450; istočasno se tvori monoetilglicen-cenksilidid (MEGE), katerega stopnja korelira s stopnjo očiščenja lidokaina. Določanje koncentracije MEGE v serumu po intravenskem dajanju lidokaina omogoča količinsko določanje delovanja jeter. Koncentracija MEGE je podvržena znatnim nihanjem pri ljudeh z zdravimi jetri in pri bolnikih z rahlo kršitvijo njegove funkcije. Pri cirozi jeter opazimo znatno zmanjšanje tega kazalnika, stopnja upadanja pa je povezana s prognozo bolezni. Pri diferencialni diagnozi med cirozo in manjšo poškodbo jeter so študija izločanja galaktoze in aminopirinskega dihalnega testa bolj informativni.
Test z antipirinom
Antipirin ima dolgo razpolovno dobo, ki lahko pri bolnikih s hudo poškodbo jeter preseže 30 ur, zato je treba vzorce krvi in sline za raziskave vzeti za daljše obdobje, kar omejuje uporabo tega vzorca za diagnostične namene.
Določanje asialoglikoproteinskih receptorjev
Hepatociti sklepajo asialoglikoproteine (s končnim galaktoznim ostankom) iz vaskularne plasti zaradi prisotnosti specifičnih receptorjev na sinusni membrani hepatocitov. Ko se jetrne parenhimske lezije zmanjšajo, se število teh receptorjev zmanjša. Ocenjuje se po stopnji zajetja v jetrih označenega 99m Tc galaktozil neoglikalbumina (analoga asialoglikoproteina), ki ga določimo s standardno scintilacijsko komoro ob enkratnem pregledu krvnega vzorca. Rezultati študije so bili v korelaciji z resnostjo bolezni (ki jo je določil sistem za otrokove kriterije), rezultati dihalnega testa z očistkom aminopirina in indocianina. Povprečna koncentracija receptorjev v končni fazi ciroze je 0,35 ± 0,07 µmol / L v primerjavi s 0,83 ± 0,06 µmol / L v kontrolni skupini [9]. Podobne rezultate dobimo pri uporabi humanega serumskega albumina, označenega z 99m Tc-dietilentriamom in npenta-acetatnim galaktozilom [5]. Število receptorjev se zmanjša z akutnim hepatitisom in se ponovno poveča v obdobju okrevanja [12]. Kljub obetavnim rezultatom se ta raziskava izvaja le v posebnih primerih.
Jetrna sposobnost izločanja (test bromsulfaleina)
Stara metoda preučevanja hitrosti izločanja intravensko injicirane BS iz vaskularne plasti omogoča oceno absorpcijske in izločilne sposobnosti hepatocitov. Ta metoda ni bila uporabljena v kliniki zaradi njene kompleksnosti, visokih stroškov in možnih zapletov [4].