Z uvedbo sodobnih tehnologij v medicini naraščajo možnosti imunokemijskih diagnostičnih metod, ki so sposobne hitro in natančno prepoznati bolezen, ko so druge metode nemočne. Razumevanje, da je virus hepatitisa B lahko v telesu v zelo nizki koncentraciji, pri katerem ga ni mogoče zaznati niti s tako zanesljivo metodo, kot je PCR, je nujno, da se ponovno proučimo problem diagnosticiranja te bolezni in ocenimo možnosti imunskega testa.
V tem gradivu bomo podrobno analizirali vse, kar se nanaša na to vrsto laboratorijskih raziskav. Spoznali boste, kaj je encimski imunski test in kako se izvaja, kaj je avstralski antigen in kako je določen, kakšne so nerazumljive okrajšave Hbs ag, Hbcor, njihova vloga pri dešifriranju analize, pa tudi veliko koristnih in zanimivih informacij.
Vsebina članka:
Splošne informacije o testu ELISA
ELISA (skrajšano ELISA) je laboratorijska diagnostična metoda, ki lahko odkrije tako antigene kot protitelesa iz številnih okužb, vključno s hepatitisom B. Trenutno znanje o lastnostih virusa in značilnostih imunskega odziva telesa omogoča ne le odkrivanje okužbe, temveč tudi njeno identifikacijo. stopnja, učinkovitost cepljenja in oceni učinkovitost zdravljenja.
Bistvo encimskega imunskega testa
ELISA temelji na reakciji „antigen-protitelo“ oziroma na njenih lastnostih.
V odgovor na invazijo tuje snovi (antigena), ki so zlasti beljakovine virusa, telo proizvaja zaščitne beljakovine - protitelesa. Protitelesa vstopijo v kompleksno reakcijo z antigenom, kar blokira njegovo aktivnost.
O antigenih in protitelesih bomo govorili spodaj, zdaj pa bomo opazili, da so za vsak antigen strogo individualni ali, kot pravijo zdravniki, homologna protitelesa. Če želimo v krvi zaznati specifični antigen, bomo uporabili diagnostično tableto z protitelesi proti njej. Če je v krvi antigen, bo reagiral s protitelesi, ki jih je mogoče zaznati na različne načine. In obratno. Če želimo najti protitelesa, potrebujemo tableto z ustreznim antigenom.
Najpogosteje, diagnostična vrednost nosi samo protitelesa, s katerimi lahko diagnosticirate skoraj vsako okužbo. Posebnost virusa hepatitisa B pa je, da glavno vlogo pri diagnozi igra en antigen - avstralski antigen.
Kako je IFA
Za specifičen primer upoštevajte tipičen postopek ELISA, če želite identificirati protitelesa proti patogenu.
Za diagnostiko uporabimo tableto s 96 vdolbinicami, ki so predhodno nasičene z ustreznim antigenom. Nadalje je postopek naslednji:
serum nanesemo na vse celice;
homologna protitelesa reagirajo z antigenom in se pripnejo na ploščo;
tablete oprane, odstranjevanje nepritrjenih protiteles;
potem se v celice vnese encimska oznaka - snov, ki reagira s protitelesi in povzroči obarvanje vsebine celice.
To je standardni postopek ELISA z barvanjem, ki se uporablja na primer v imunokromatografskih testnih trakovih.
ELISA ni omejena na kvalitativno določanje protiteles ali antigenov patogena. Več celic v tabletah vsebuje več protiteles, intenzivnejša pa je obarvana raztopina. Če primerjamo svojo optično gostoto s kontrolo, lahko sodobna oprema dokaj natančno izračuna koncentracijo protiteles na enoto volumna. Tako se izvede kvantitativni ELISA, merilo merjenja, pri katerem so najpogosteje enote optične gostote (EOP).
Imunokemiluminiscenčna analiza
Danes obstaja več deset vrst ELISA, od katerih ima vsak prednost. Najbolj priljubljena pri diagnozi hepatitisa B je imunokemiluminiscenčna analiza.
Encimatska oznaka za to analizo ni kromatin, kot pri standardnem ELISA testu, temveč posebne snovi - fosforji, ki povzročajo, da kompleks zažara v ultravijolični svetlobi.
S pomočjo posebne naprave - luminometra, lahko natančno določite stopnjo emisije in posledično koncentracijo želene snovi.
Z uporabo metod ELISA določimo skoraj vse obstoječe antigene virusa hepatitisa B in protitelesa proti njim.
Antigeni virusa hepatitisa B: Hbs, Hbe in Hbc
Izraz antigen (antigen) izhaja iz dveh angleških besed: protitelesa - protitelesa in generatorja - proizvajalca. Torej, pod antigen razumeti vse snovi, ki povzroča nastanek protiteles v telesu, da ga. Najpogostejši antigeni so proteinske spojine.
Danes so znani trije antigeni virusa hepatitisa B: hbsag, hbc in hbe.
Avstralski antigen
Protein, ki je del zunanje lupine patogena hepatitisa B, smo odkrili že dolgo pred odkritjem samega virusa. Ta antigen je dobil ime, ker so ga prvič odkrili avtohtoni prebivalci Avstralije. Vendar se sprva beljakovina ni štela za antigen, temveč je bila povsem običajen element krvi med domačini, zavedanje o njeni povezanosti z boleznimi jeter pa je prišlo malo kasneje.
Dolgotrajno ohranjanje antigena v krvi in odsotnost protiteles kaže na možnost nastanka HBeAg-pozitivnega kroničnega hepatitisa B t
Danes v strokovni literaturi ime »avstralski antigen« praktično ni mogoče najti in ga je nadomestila mednarodna kratica - HbsAg (površinski antigen hepatitisa b - površinski antigen hepatitisa B). Poleg tega lahko najdete kratice hbs antigen ali samo hbs. Vsaka od teh okrajšav je sprejemljiva in jo je mogoče dopolniti s snemanjem HBV ali HBV - virusa hepatitisa B (virus hepatitisa b).
Površinski antigen virusa hepatitisa B ima eno izjemno značilnost, zaradi katere je nepogrešljiv diagnostični marker - njegova koncentracija v krvi lahko doseže zelo visoke ravni, do pol miligrama na mililiter krvi. To je zato, ker le majhen del novih HBsAg, ki se oblikujejo med razmnoževanjem virusa hepatitisa B, gredo v konstrukcijo membran novih virusnih delcev, ostalo pa prosto kroži v krvi. Posledično lahko število delcev hbs v krvi preseže število virusov na stotine tisočkrat.
Zaradi tega je avstralski antigen glavni marker pri diagnosticiranju hepatitisa B, ki ga odkrijemo v krvi že 4-6 tednov po okužbi. Ko se tvorijo protitelesa, se površinski antigen postopoma nadomesti z njimi. Če po 6 mesecih HBsAg vztraja, to kaže na prehod okužbe na kronično obliko.
V zadnjem času, ko je bilo mogoče določiti koncentracijo hbs hbs, se je njegova vloga pri diagnozi še povečala, saj lahko zanašanje na raven antigena loči kronični hepatitis B (HBV) od zdravega nosilca in spremlja učinkovitost zdravljenja.
Antigeni jeder
V jedru virusa - nukleokapsidu - so beljakovine, ki nadzorujejo razmnoževanje virusa HBcoreAg in HBeAg.
HBcoreAg, ki ga lahko imenujemo tudi HBCore-antigen, hbc ali jedrni antigen, lahko najdemo le v tkivih jeter, neposredno v jedrih hepatocitov. Ta antigen ni odkrit v krvi in nima diagnostične vrednosti.
Struktura virusa hepatitisa
HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - nasprotno, igra pomembno vlogo pri diagnozi. HBeAg in HBcoreAg sta bližnji sorodniki. Imajo veliko podobnost strukture in se večinoma razlikujejo v prostorskem položaju molekul. Za razliko od HBcore, HBe ni del nukleokapsidne stene in prosto kroži v krvi.
Vloga HBe v infekcijskem procesu ni dovolj jasna, vendar so posebnosti njegovega obnašanja in njihovega odnosa s potekom infekcijskega procesa že dovolj raziskane. HBeAg označuje aktivno razmnoževanje virusa in vam omogoča, da zanesljivo določite fazo kroničnega CHB - HBeAg-pozitivnega ali HBeAg-negativnega.
HBe se lahko odkrije v krvi že v inkubacijskem obdobju akutnega virusa hepatitisa B (HBV), medtem ko visoka koncentracija HBeAg 3 tedne najverjetneje kaže na nevarnost kroničnega procesa. Koncentracija HBe je neposredno povezana z vsebnostjo Dane delcev (ti delci virusa hepatitisa B) - večja je količina HBe, večja je koncentracija HBV DNA v krvi.
HBeAg je glavni marker nalezljivosti bolezni. Kri HBeAg-pozitivnih bolnikov je veliko bolj nalezljiva kot HBeAg-negativna. Na primer, pri nosečnicah, pozitivnih za HBe in Hbs, je verjetnost prenosa okužbe na otroka 50%, verjetnost takšnega dogodka pri HBe negativnih, vendar Hbs pozitivnih mater pa je 10-30%.
Hbe določa potek kroničnega hepatitisa. HBeAg-pozitivni kronični hepatitis B ima veliko bolj neugodno prognozo v smislu razvoja ciroze.
To je verjetno vse, kar morate vedeti o antigenih HBV, in preidemo na drugo skupino označevalcev hepatitisa B - protitelesa.
Bistvo in diagnoza hepatitisa B
Takoj, ko se faza spremeni v zlatenico, se intogumenti in sluznice začnejo rumeno obarvati, zdravstveno stanje se močno poslabša. Pomembno je poudariti, da jetra rastejo in izstopajo pod obalnim lokom. Barvanje kože v rumeni barvi se pojavi postopoma. Količina jetrnih encimov raste v krvi, vzorec timola pa se ne spremeni.
Diagnosticiranje bolezni: osnovne metode in koncepti
Diagnoza hepatitisa B se izvaja na več načinov:
1. Najprej mora zdravnik vzeti anamnezo in opraviti temeljito raziskavo osebe. Med raziskavo je velik poudarek na takih trenutkih, kot so:
- ali uvedba zdravil ali drugih sredstev za intravensko uporabo;
- ali so bile transfuzije krvi;
- ali so bile izvedene kirurške posege;
- ali je prišlo do poškodbe integritete kože;
- kakšni so spolni odnosi;
- ali je bolnik imel stik z bolnikom s hepatitisom B ali njegovim nosilcem.
Če je prišlo do katerega od teh elementov, je določeno, kako dolgo. Navadno pride do okužbe, ko pride v stik od 6 tednov do 6 mesecev, preden se pojavijo prvi simptomi hepatitisa.
2. Laboratorijska diagnoza hepatitisa B, ELISA analiza krvi za antigene in protitelesa proti hepatitisu B. Ta vrsta pregleda je namenjena identifikaciji 3 antigenov:
- HBsAg (antigen, ki se nahaja površinsko), t
- HBcAg (znotraj)
- HBeAg (medsebojno povezan s prejšnjim antigenom). Za bolezen je značilno zgodnje odkrivanje teh antigenov v krvi.
Ljudje, ki trpijo za hepatitisom B in vsebujejo te antigene v krvi, so zelo nalezljivi. Lahko okužijo druge ljudi. Če je v človeški krvi HBsAg odsoten, to pomeni, da je zdrav. Če je oseba bolna, potem telo začne izločati protitelesa na obstoječe antigene.
3. Diagnoza hepatitisa B z uporabo tehnike PCR, zasnovane za odkrivanje HBV DNA v obtočnem sistemu. Če je rezultat pozitiven, ima oseba hepatitis. Analiza za HBV DNA se imenuje kvalitativna. Obstaja tudi kvantitativna PCR. Kvantitativna PCR je priložnost za identifikacijo obremenitve s prisotnostjo virusa hepatitisa. Kaj je virusna obremenitev? To je število kopij HBV DNA v 1 ml krvi. Kvantitativna analiza hepatitisa prikazuje aktivnost virusa.
4. Krvni test za biokemijo. Ta analiza vključuje določitev števila encimov, ki jih proizvajajo jetra. Takšni encimi vključujejo ALT, AST. Nahajajo se znotraj jetrnih celic - hepatocitov. Če so jetrne celice poškodovane, se encimi sprostijo in vstopijo v kri. Pozitivna analiza se upošteva le, kadar število jetrnih encimov presega normo. Raziskava kaže, ali obstajajo vnetni procesi v jetrih in njihova aktivnost.
5. Ultrazvočni pregled, elastometrija itd. Diagnozo hepatitisa je mogoče izvesti in ne-laboratorijske metode. Z ultrazvokom pregledamo trebušne organe. Ultrazvok daje jasno sliko pri vseh vnetnih procesih jeter in njenih žil. Učinkovito izvajanje elastometrije jeter. Metoda elastometrije daje idejo o stopnji fibroze v jetrnem tkivu.
6. Najpomembnejša analiza je prisotnost antigenov hepatitisa B v masi rdečih krvnih celic, če obstajajo, to kaže na prisotnost okužbe v človeškem telesu.
7. Laboratorijski tip diagnoze hepatitisa vključuje določanje antigenov in protiteles v masi eritrocitov. Najpogostejši HBsAg se kaže v krvnem obtoku tudi v inkubacijskem obdobju hepatitisa. Oseba ne ve za razvoj svoje bolezni in v krvi že potekajo spremembe. Ko je hepatitis akuten, HBsAg izgine iz krvi. Običajno HBsAg ni prisoten v prvem mesecu icteričnega obdobja in protitelesa proti temu antigenu se začnejo pojavljati v cirkulacijskem sistemu 90 dni po okužbi.
Pozitiven test na protitelesa ne pomeni, da ima oseba hepatitis. Možno je, da je že prej imel hepatitis brez D-sredstva. Če po zdravljenju v krvi pacienta ni HBsAg, vendar obstajajo protitelesa, to kaže na dobro prognozo, ki kaže na to, da bolnik okreva. Če ima bolnik kronični ali hud hepatitis, se lahko pojavijo protitelesa že od prvih dni icteričnega obdobja.
Zanesljiv ekvivalent je anti-HBc IgM v krvi. Razkrivajo se ob koncu predzgodnega obdobja. Prisotni so v celotnem obdobju očitnih manifestacij. Če analiza vsebuje anti-HBc IgM, to pomeni, da se virus še naprej razmnožuje. Po nastopu okrevanja anti-HBc IgM izgine. Akutna faza bolezni lahko povzroči test anti-HBc IgG. Zaznali se bodo skozi celotno življenje osebe.
Ko se obdobje inkubacije hepatitisa (zlasti avtoimunskega) konča, se v krvi pojavi HBeAg. Obveščajo o aktivni delitvi in povečanju infekcijskih delcev. Takoj po začetku ikteričnega obdobja NVAAg izgine. Nadomešča ga anti-HBe. Anti-HBe kaže, da se aktivnost okužbe zmanjša in okrevanje bo kmalu prišlo. Toda reprodukcija virusa se ne ustavi!
Akutni hepatitis se lahko spremeni v kronično. O tem bo govoril identificiran v krvi HVеАg. Če je prisotna, pomeni, da je verjetnost preoblikovanja procesa v kronično obliko visoka. Prisotnost HeVaga označuje zelo nalezljivega pacienta.
Ne smemo pozabiti, da laboratorijska diagnoza hepatitisa B, ki daje negativen rezultat za HBsAg, ne izključuje same diagnoze. Pomemben ključni element je prisotnost anti-HBc IgM v krvi. Ta protitelesa bodo natančno potrdila bolezen. Če krvni test ne vsebuje anti-HBc IgM, lahko to kaže na prisotnost HBV in prisotnost teh protiteles kaže na povečanje okužbe.
Odkrivanje DNK hepatitisa B
Najpomembnejša študija za ugotavljanje prisotnosti virusne DNA je PCR. Analiza kaže na aktivnost infekcijskega procesa. S to metodo se lahko seznanite z napovedjo bolezni.
Če je hepatitis ugodnejši, potem HBV DNA izgine iz krvi v začetnih obdobjih okužbe. Laboratorijska diagnostika v obliki PCR zagotavlja podatke o kakovosti zdravljenja (učinke določenega zdravila).
Da bi razumeli, kakšne taktike je treba sprejeti za imenovanje terapevtskih ukrepov, je treba izvesti kvantitativno metodo PCR. Kvantitativna PCR dokazuje pozitivno reakcijo zdravljenja.
Podlaga za diagnozo
Za ustrezno diagnozo bodo potrebne naslednje preiskave:
- Dnevni pregled, palpacija.
- Ultrazvok jeter.
- Biokemična analiza krvi (opravljena večkrat).
- Pregled za HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, skupno anti-HBc, HBV DNA.
- Markerji za HBV in HCV (virusni hepatitis je izključen).
- Punkcija jeter.
- Biopsija jeter. S pomočjo posebne igle se predrtje trebušna stena in za histološko preiskavo se odvzame majhen košček jeter (velikost ne presega polovice grama). Biopsija je najnovejša metoda testiranja na hepatitis. Zahvaljujoč njej lahko najbolj natančno govorimo o stopnji aktivnosti infekcijskega procesa, fibrozi jeter. Biopsija je kirurški postopek. Lahko povzroči zaplete, zato se pogosto ne uporablja za diagnozo.
- Fibroelastografija. Lahko se uporablja za ocenjevanje gostote jetrnega tkiva. Tehnika je podobna ultrazvoku. Študija uporablja poseben senzor, ki je nameščen na koži na mestu projekcije jeter.
- Fibrotest. Temelji na štetju nekaterih krvnih slik.
Kronični hepatitis B
Faza kroničnega hepatitisa B:
Faza 1 - Replikacija virusa. Virus se razmnožuje z večjo aktivnostjo.
2. faza - integracija. Virus preneha razmnoževati. Virusni genom se začne vključevati v DNA normalnih jetrnih celic, hepatocitov.
Za določitev stopnje napredovanja virusa je pomembno razumeti resnost postopka, izid, stopnjo motenj v jetrih. Laboratorijska diagnoza kroničnega hepatitisa temelji na odkrivanju:
Če je hepatitis HBeAg-pozitiven (pozitivna analiza), bo v masi eritrocitov:
- v fazi razmnoževanja - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (skupaj), HBV DNA;
- v fazi vstavljanja hepatocitov v DNA - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (skupno), HBV DNA.
Če je hepatitis seronegativen, bodo v masi krvi prisotne HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNA. Poleg tega njihova prisotnost nikakor ni odvisna od stopnje infekcijskega procesa.
Diferencialna diagnostika
Pri postavljanju diagnoze je zdravnik dolžan razlikovati hepatitis B z drugimi boleznimi - hepatitisom A, C, E, D. Končno diagnozo lahko naredimo šele potem, ko v krvni masi ugotovimo določene znake, specifične za vsak hepatitis.
Hepatitis je treba razlikovati od drugih pomembnih bolezni: akutnih virusnih okužb dihal, žolčnih kamnov, zastrupitve s hrano, črevesne okužbe, kirurške patologije trebušnih organov in mnogih drugih bolezni.
Avtoimunski hepatitis
Pri avtoimunskem hepatitisu diagnoza vključuje naslednje najpomembnejše preiskave:
- Analiza mase rdečih krvnih celic (OAK). Pojasnilo: anemijo (normocitno) v krvi opazimo pri avtoimunskem hepatitisu, zmanjšani vsebnosti levkocitov, trombocitih in povečani ROE. Lahko pa pričakujemo višjo stopnjo anemije.
- Urin. Dešifriranje urina: vsebuje beljakovine, rdeče krvne celice, bilirubin.
- Krvni test za biokemijo. Zelo pomembna analiza. Interpretacija: povečana količina bilirubina, povečana arginaza, zmanjšanje albumina, povečanje γ-globulinov in timolov. Sublimatni test se zmanjša. Nekateri kazalniki se lahko povečajo za 2 ali večkrat. To je pozitiven test za avtoimunski hepatitis.
- Imunološka analiza. Dekodiranje: zmanjšajo se zaviralci T-limfocitov, pojavijo se lupusne celice v masi eritrocitov, število imunoglobulinov se poveča, protitelesa proti eritrocitom.
Pozitiven test na hepatitis se lahko odkrije s serološko metodo raziskav. Avtoimunski hepatitis je heterogena bolezen.
ELISA za virusni hepatitis
9. marec 2017, 16:25 Strokovni članki: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3.608
Za odkrivanje virusnega hepatitisa v telesu zdravilo široko uporablja encimski imunski test, ki temelji na odkrivanju koncentracije in vrste antigenov z uporabo protiteles in encimov. Izvaja se v fazah, z laboratorijskimi raziskavami, z visoko natančnostjo indikacij. Odvisno od količine in razreda protiteles, barve in koncentracije encima, ki uporablja ELISA, in zato zdravnik diagnozo bolezni, spremembe.
Kaj je ELISA?
Prisotnost virusnega hepatitisa v telesu bolnika je določena z uporabo serološke metode analize krvi za prisotnost virusa HCV in označevalcev (teles in protiteles), ki to kažejo. Encimsko vezani imunski test (ELISA) preučuje različne viruse, spojine z nizko molekulsko maso, makromolekule, njihove kvalitativne in kvantitativne kazalnike z uporabo manifestacije reakcije na njihove antigene. V ta namen uporabite encim kot oznako za registracijo signala. Vse pogosteje se uporablja v medicini, ker ELISA jasno ugotavlja, da so antigeni dobro opredeljeni, ne da bi jih zmedli z drugimi, in je zelo občutljiva na prisotnost invazije pri virusnem hepatitisu.
Pomanjkljivost takšne diagnoze je nezmožnost ugotoviti vzrok bolezni, saj ta metoda kaže le reakcijo imunskega sistema. Na rezultate analize vpliva cepljenje, ki je bilo opravljeno prej. 8 ur pred analizo se priporoča, da se ne jede nikotin, alkohol. Osnova testa ELISA je encimski in imunski odziv telesa na virus. Biološke molekule se vežejo na celico in njene elemente, mikroorganizme, odkrijejo virus, nato delajo encime, ki vam omogočajo, da izrazite imunski odziv v vidnem in merljivem parametru.
Indikacije za analizo
Virusni hepatitis v telesu lahko povzroči rak in cirozo jeter. Pomembnost pravočasne diagnoze je nesporna. Primarna metoda diagnoze je test ELISA, ki z visoko natančnostjo določa prisotnost virusa HCV (IgM in IgG) ter aktivnost njegovih elementov v sledovih. Obvezni testi za prehod virusnega hepatitisa: t
- Osebe z rizičnimi skupinami (odvisniki od drog, osebe z aidsom, zaposleni v zdravstvenih in kazenskih organih).
- Osebe z akutnim ali kroničnim hepatitisom.
- Nosečnice in nosečnice, ki načrtujejo nosečnost.
ELISA prepozna bolezen v kateri koli fazi. Rezultati analize so v povprečju pripravljeni v 2 dneh.
Merila, ki določajo pomen analize
ELISA test določa prisotnost protiteles razreda IgG, IgM, IgA. Pri diagnosticiranju virusnega hepatitisa zdravnik ne posveča pozornosti njihovemu tipu, saj prisotnost kakršnekoli takšne manifestacije virusa HCV že kaže na akutno ali kronično fazo bolezni. V zgodnjih fazah bolezni se raven IgM dvigne (5 dni po okužbi); 15. in 20. dan se pojavijo protitelesa IgG, ki lahko ostanejo v človeški krvi že dolgo po zdravljenju; IgA se pojavi po 10-14 dneh, po zdravljenju se zmanjša.
Če se IgG in IgA zaznajo po uporabi zdravil in njihova raven ostane enaka - nosilec ima kronično obliko hepatitisa. Pomembno merilo testa bo jasna opredelitev razreda razpoložljivih protiteles in njihove količine. Na podlagi tega lahko veste ne samo o prisotnosti bolezni, temveč tudi o fazi njenega razvoja. Z odkrivanjem takšnih elementov v krvi pacienta je mogoče predpisati pravilno in pravočasno zdravljenje, da se preprečijo resnejše posledice.
Kako je to storjeno?
Dodelite neposredni in ne neposredni test ELISA. Direktne faze:
- Zbiramo biološki material in ga damo v posebne luknje.
- V 15-30 minutah antigeni pritrjeni na površino vdolbinic.
- Dodamo protitelesa na vdolbinice na ugotovljeni antigen. Vse je ostalo 1 do 5 ur.
- Odstranite nepovezane antigene (nalijete vsebino v vdolbinice).
- Vdolbinice izperite s posebno raztopino.
- Dodajte raztopino encima v vdolbinice. Pustite 30 minut - 1 uro.
- Uporaba kolorimetrije (odkrivanje barve in koncentracije barve vsebine v vrtini, primerjava s kazalniki, ki so neposredno sorazmerni koncentraciji virusa).
Posredna metoda ELISA poteka z uporabo neoznačenih protiteles proti najdenim antigenom in naknadnim dodajanjem označenih na njih. Najprej se odvzame kri od pacienta in se razširi skozi vdolbine za 15-30 minut. (protitelesa so fiksirana z luknjami). Nato se v njih vnesejo neoznačena protitelesa za 1–5 ur (tvori se povezava protiteles z antigeni - imunski kompleks). Nato iz vdolbinic nalijemo nevezane mikroelemente in jih speremo s posebno raztopino. V naslednji fazi laboratorijski tehnik doda v vdolbinice označene elemente v sledovih za 15-30 minut. (to veže neoznačeno z označeno z nastankom kompleksa "protiteles-protitelo-antigen"). Pri odcejanju in pranju z raztopino se ponovno odstranijo ekstra (ohlapno). Sledi encim, ki spremeni barvo v 5-30 minutah. ostanki v luknjah in barvni podatki se primerjajo s podatki tabelarnih kazalcev. Posredna ELISA je bolj natančna.
Kaj prikazuje test ELISA za virusni hepatitis?
ELISA omogoča zaznavanje prisotnosti okužbe (virusi hepatitisa vseh vrst, HIV, herpes, sifilis, citomegalovirus, ošpice, rdečka, virus mumpsa, virus Epstein-Barr), je marker avtoimunskih bolezni, rakavih celic. Označuje kršitve reproduktivnih funkcij (spremembe testosterona, prolaktina, estradiola in progesterona), okvaro ščitnice, infestacija s helmiti, klamidija. Učinkovito za odkrivanje ureaplasmoze, oslovskega kašlja, virusa Dange, virusa zahodnega Nila, Borrelia. Seznam definicij je visok, vključuje veliko elementov.
Potrditev rezultatov
Določanje antigena virusa HCV z ELISA daje 98% natančnost. Uporablja se tudi za ponovno testiranje biološkega materiala z mehkimi predhodnimi indikatorji. Prisotnost antigenov IgM ni indikator za akutni hepatitis in zahteva dodatne raziskave. Ko se test ELISA ponovi, se rezultati pokažejo za 90–100%. V primeru minimalnega odstopanja se kot indikator upošteva povprečna vrednost. Za največjo natančnost v smislu zdravniki svetujejo vzporedno z izvajanjem biokemične analize krvi. Za testiranje rezultatov po encimskem imunskem testu lahko uporabite druge diagnostične metode.
Študije o virusu hepatitisa B (ELISA in PCR) t
Antigen virusa hepatitisa B (s) (HBsAg)
Površinski antigen hepatitisa B v serumu običajno ni prisoten.
Zaznavanje površinskega antigena hepatitisa B (HBsAg) v serumu potrjuje akutno ali kronično okužbo z virusom hepatitisa B.
Pri akutni bolezni se HBsAg odkrije v serumu v zadnjih 1-2 tednih obdobja inkubacije in prvih 2-3 tednih kliničnega obdobja. Kroženje HBsAg v krvi je lahko omejeno na nekaj dni, zato si morate prizadevati za zgodnji začetni pregled bolnikov. Metoda ELISA omogoča odkrivanje HBsAg pri več kot 90% bolnikov. Skoraj pri 5% bolnikov najobčutljivejše raziskovalne metode ne odkrijejo HBsAg, v takih primerih pa etiologijo virusnega hepatitisa B potrjuje prisotnost anti-HBcAg JgM ali PCR.
Koncentracija HBsAg v serumu pri vseh oblikah resnosti hepatitisa B na višini bolezni ima velik razpon nihanj, vendar obstaja določen vzorec: v akutnem obdobju obstaja obratna povezava med koncentracijo HBsAg v serumu in resnostjo bolezni.
Visoke koncentracije HBsAg so pogostejše pri blagih in zmernih oblikah bolezni. V hudih in malignih oblikah je koncentracija HBsAg v krvi pogosto nizka, pri 20% bolnikov s hudo obliko in v 30% z malignim antigenom v krvi pa morda sploh ni mogoče zaznati. Pojav na tem ozadju pri bolnikih s protitelesi proti HBsAg velja za neugoden diagnostični znak; ugotavlja se v malignih oblikah hepatitisa B.
V akutnem poteku hepatitisa B se koncentracija HBsAg v krvi postopoma zmanjšuje do popolnega izginotja tega antigena. HBsAg izgine pri večini bolnikov v 3 mesecih po nastanku akutne okužbe.
Zmanjšanje koncentracije HBsAg za več kot 50% do konca tretjega tedna akutnega obdobja praviloma kaže na zaključek procesa okužbe. Običajno se pri bolnikih z visoko koncentracijo HBsAg na višini bolezni odkrije v krvi več mesecev.
Pri bolnikih z nizko koncentracijo HBsAg izgine veliko prej (včasih nekaj dni po začetku bolezni). Na splošno je čas odkrivanja HBsAg od nekaj dni do 4-5 mesecev. Najdaljše obdobje odkrivanja HBsAg z gladkim potekom akutnega hepatitisa B ne presega 6 mesecev od začetka bolezni.
HBsAg je mogoče najti pri zdravih ljudeh praviloma v profilaktičnih ali nenamernih študijah. V takih primerih se pregledajo drugi markerji virusnega hepatitisa B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg in preučijo delovanje jeter.
V primeru negativnih rezultatov so potrebne ponavljajoče se študije na HBsAg.
Če se pri ponovljenih krvnih preiskavah, ki trajajo več kot 3 mesece, pokaže HBsAg, je ta bolnik razvrščen kot kronični bolnik z virusnim hepatitisom B.
Prisotnost HBsAg je zelo pogosta. Na svetu je več kot 300 milijonov prevoznikov, v naši državi pa je okoli 10 milijonov prevoznikov.
Prenehanje krvnega obtoka HBsAg in kasnejša serokonverzija (tvorba anti-HBs) vedno kaže na sanacijo telesa.
Krvni test za prisotnost HBsAg se uporablja za naslednje namene: t
- inkubacijsko obdobje;
- akutna bolezen;
- predčasno okrevanje;
- kronični hepatitis;
- ciroza jeter;
za odkrivanje in identifikacijo bolnikov v rizičnih skupinah: t
Vrednotenje rezultatov raziskav
Rezultati študije so izraženi kvalitativno - pozitivno ali negativno. Negativni rezultat kaže odsotnost seruma HBsAg. Pozitiven rezultat - identifikacija HBsAg kaže na inkubacijo ali akutno obdobje akutnega virusnega hepatitisa B kot tudi pri kroničnem virusnem hepatitisu B.
Protitelesa proti jedrskemu antigenu virusa hepatitisa B JgG (anti-HBcAg JgG) t
Običajno je serumski anti-HBcAg odsoten v serumu.
Pri bolnikih z anti-HBcAg se JgG pojavi v akutnem obdobju virusnega hepatitisa B in traja vse življenje. Anti-HBcAg JgG je vodilni marker prenosa HBV.
Preskusi krvi za anti-HBcAg JgG se uporabljajo za diagnosticiranje:
Vrednotenje rezultatov raziskav
Rezultat študije je izražen kvalitativno - pozitivno ali negativno. Negativni rezultat kaže odsotnost serumskega anti-HBcAg JgG. Pozitiven rezultat - identifikacija anti-HBcAg JgG pomeni akutno okužbo, okrevanje ali predhodno prenesen virusni hepatitis B. t
Antigen virusa hepatitisa B "e" (HBeAg)
Običajno HBeAg v serumu ni prisoten.
HBeAg najdemo v serumu večine bolnikov z akutnim virusnim hepatitisom B. Ponavadi izgine v krvi pred antigenom HBs. Visoka raven HBeAg v prvih tednih bolezni ali njeno odkrivanje več kot 8 tednov daje razlog za sum kronične okužbe.
Ta antigen se pogosto odkrije pri kroničnem aktivnem hepatitisu virusne etiologije. Posebno zanimanje za definicijo HBeAg je dejstvo, da njegova detekcija označuje aktivno replikacijsko fazo infekcijskega procesa. Ugotovljeno je bilo, da visoke koncentracije HBeAg ustrezajo visoki aktivnosti DNA polimeraze in so značilne za aktivno replikacijo virusa.
Prisotnost HBeAg v krvi kaže na njeno visoko infektivnost, tj. prisotnost aktivne okužbe s hepatitisom B v telesu, ki se pregleduje, in se odkrije le v prisotnosti antigena HBs v krvi. Pri bolnikih s kroničnim aktivnim hepatitisom se protivirusna zdravila uporabljajo le takrat, ko se v krvi odkrije HBeAg. HBeAg - antigen - marker akutne faze in replikacije virusa hepatitisa B.
Za diagnosticiranje se uporablja krvni test za prisotnost antigena HBe:
Vrednotenje rezultatov raziskav
Rezultat študije je izražen kvalitativno - pozitivno ali negativno. Negativni rezultat kaže odsotnost serumskega HBeAg. Pozitiven rezultat - odkrivanje HBeAg pomeni inkubacijo ali akutno obdobje akutnega virusnega hepatitisa B ali nadaljnjo replikacijo virusa in nalezljivost bolnika.
Protitelesa proti antigenu "e" virusa hepatitisa B (anti-HBeAg) t
Anti-HBeAg v serumu je navadno odsoten. Pojav protiteles proti HBeAg navadno kaže na intenzivno odstranitev virusa hepatitisa B iz telesa in manjšo okužbo bolnika.
Ta protitelesa se pojavijo v akutnem obdobju in trajajo do 5 let po okužbi. Pri kroničnem persistentnem hepatitisu se anti-HBeAg nahaja v krvi bolnika skupaj s HBsAg. Serokonverzija, tj. prehod HBeAg na anti-HBeAg, s kroničnim aktivnim hepatitisom, ki je pogosteje prognostično ugoden, vendar ista serokonverzija ne izboljša prognoze za hudo cirozno transformacijo jeter.
Krvne preiskave za prisotnost anti-HBeAg se uporabljajo v naslednjih primerih pri diagnozi virusnega hepatitisa B:
Vrednotenje rezultatov raziskav
Rezultat študije je izražen kvalitativno - pozitivno ali negativno. Negativni rezultat kaže na odsotnost protiteles proti HBeAg v serumu. Pozitiven rezultat je odkrivanje protiteles proti HBeAg, ki lahko kažejo na začetno fazo akutnega virusnega hepatitisa B, akutno obdobje okužbe, zgodnjo fazo okrevanja, okrevanje, pred kratkim prenesen virusni hepatitis B ali persistentni virusni hepatitis B. t
Kriteriji za prisotnost kroničnega hepatitisa B so:
Odkrivanje virusa hepatitisa B s PCR (kvalitativno)
Virus hepatitisa B v krvi običajno ni prisoten.
Kvalitativna določitev virusa hepatitisa B po metodi PCR v krvi omogoča potrditev prisotnosti virusa v telesu pacienta in s tem ugotavljanje etiologije bolezni.
Ta študija zagotavlja koristne informacije za diagnozo akutnega virusnega hepatitisa B v inkubacijski in zgodnji razvojni fazi bolezni, kadar bolnikovi glavni serološki označevalci v krvi niso prisotni. Serumska virusna DNA je odkrita pri 50% bolnikov v odsotnosti HBeAg. Analitična občutljivost metode PCR ni manjša od 80 virusnih delcev v 5 μl, zadnji vzorec DNK, specifičnost - 98%.
Ta metoda je pomembna za diagnosticiranje in spremljanje poteka kroničnega HBV. Približno 5-10% primerov ciroze in drugih kroničnih bolezni jeter povzroča kronični nosilec virusa hepatitisa B. Marker aktivnosti teh bolezni je prisotnost HBeAg in DNA virusa hepatitisa B v krvi.
Metoda PCR omogoča določitev DNK virusa hepatitisa B v krvi tako kvalitativno kot kvantitativno. Določen fragment v obeh primerih je edinstvena DNA sekvenca gena strukturnega proteina virusa hepatitisa B.
Odkrivanje DNA virusa hepatitisa B v biomaterialu z uporabo PCR je potrebno za:
Izginotje DNA hepatitisa B iz krvi je znak učinkovitosti zdravljenja
Odkrivanje virusa hepatitisa B s PCR (kvantitativno)
Ta metoda zagotavlja pomembne informacije o intenzivnosti razvoja bolezni, učinkovitosti zdravljenja in razvoju odpornosti na aktivne droge.
Za diagnozo virusnega hepatitisa s PCR v serumu uporabljamo testne sisteme, katerih občutljivost je 50-100 kopij v vzorcu, kar omogoča odkrivanje virusa pri koncentraciji 5 x 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopije / ml. PCR pri virusnem hepatitisu B je vsekakor potreben za presojanje virusne replikacije.
Serumska virusna DNA je odkrita pri 50% bolnikov v odsotnosti HBeAg. Krvni serum, limfociti in hepatobiopsija lahko služijo kot material za odkrivanje DNA virusa hepatitisa B.
- Ocena ravni viremije je naslednja:
- manj kot 2,10 ^ 5 kopij / ml (manj kot 2,10 ^ 5 ie / ml) - nizka viremija;
- od 2.10 ^ 5 kopij / ml (2.10 ^ 5 IU / ml) do 2.10 ^ 6 kopij / ml (8.10 ^ 5 IU / ml) - srednja viremija;
- več kot 2,10 ^ 6 kopij / ml - visoka viremija.
Obstaja povezava med izidom akutnega virusnega hepatitisa B in koncentracijo HBV DNA v krvi bolnika. Pri nizki stopnji viremije je proces kroničenja okužbe blizu ničle, s povprečjem pa je proces kroničen pri 25-30% bolnikov in z visoko stopnjo viremije akutni virusni hepatitis B najpogosteje postane kroničen.
Indikacije za zdravljenje kroničnega interferona alfa HBV je treba upoštevati kot prisotnost označevalcev aktivne virusne replikacije (odkrivanje HBV HBV, HBeAg in HBV DNA v krvnem serumu v zadnjih 6 mesecih).
Merila za ocenjevanje učinkovitosti zdravljenja so izginotje HBEAg in HBV DNA v krvi, ki ga običajno spremlja normalizacija ravni transaminaz in dolgotrajna remisija bolezni, HBV DNA izgine iz krvi do 5. meseca zdravljenja pri 80% bolnikov. Zmanjšanje ravni viremije za 85% ali več do tretjega dne od začetka zdravljenja v primerjavi z izhodiščem je hiter in dokaj natančen kriterij za napovedovanje učinkovitosti zdravljenja.
Raziskave virusnega hepatitisa po metodi ife
ELISA pri diagnozi virusnega hepatitisa. Sposobnosti encimske imunske preiskave
Specifična laboratorijska diagnoza virusnega hepatitisa temelji na uporabi imunokemijskih in molekularno-bioloških raziskovalnih metod. Glavne imunokemijske metode so radioizotop ali radioimunska (RIA) in imunoanaliza (ELISA). Imunokemijske diagnostične metode temeljijo na specifičnem medsebojnem delovanju antigena - protitelesa s kasnejšo identifikacijo kompleksa s pomočjo posebnih oznak. Najpogostejši encimski imunski test.
Prva poročila o uporabi encimskega imunskega testa. kot metodo za določanje snovi so bile objavljene leta 1971 hkrati dve raziskovalni skupini - B. Van Weemen, A. Schuurs in E. Engvall, P. Perlmann. Enzimski imunski preskus temelji na naslednjem načelu: na trdni fazi, ki večinoma uporablja površino vdolbin polistirenske tablete, je fiksiran antigen infekcijskega sredstva ali protitelesa (pogosto mešanica protiteles) z antigeni, ki jih je treba odkriti. Ta antigen ali protitelesa, ki so fiksirana na trdni fazi, imenujemo imunosorbent.
Kot rezultat inkubacije imunosorbenta in testnega seruma v prisotnosti detektabilnega sredstva se vežejo na kompleks antigen - protitelo. Po postopku pranja, med katerim odstranimo nevezane antigene in protitelesa, izvedemo inkubacijo s konjugatom. Kot konjugat za detekcijo HBsAg uporabljamo anti-HBs pri odkrivanju protiteles proti virusu hepatitisa C - protitelesa proti humanim imunoglobulinom (antivirusnemu konjugatu), označenim s hren peroksidazo. Kot rezultat te inkubacije pride do vezave na že obstoječe antigenske komplekse - protitelo dodatno uvedenega konjugata. Po odstranitvi nevezanega konjugata (pranje) se substrat vnaša v vdolbinice. Pri uporabi konjugata peroksidaze se vodikov peroksid uporablja kot substrat v kombinaciji z indikatorjem, ki se najpogosteje uporablja kot ortofenilendiamin (OPD) ali tetrametilbenzidin (TMB). Rezultat se oceni fotometrično.
Kakovost in zanesljivost analitičnih zmogljivosti encimske imunske metode je označena s številnimi merili, ki vključujejo občutljivost, specifičnost, natančnost in ponovljivost.
Občutljivost je najmanjša količina snovi, ki jo lahko odkrijemo z encimskim imunskim preskusom. V tem primeru je spodnja meja občutljivosti te metode koncentracija preskusne snovi v vzorcu, ki ustreza najmanjšemu pozitivnemu rezultatu določitve, ki se statistično pomembno razlikuje od kazalnikov namerno negativnih vzorcev. Občutljivost IFTS je odvisna od številnih okoliščin, povezanih z načrtovanjem preskusnega sistema (afiniteta imunosorbenta, kakovostjo ekstrakcijskega in puferskega sistema) ter ločljivostjo in natančnostjo metode registracije.
Specifičnost - sposobnost natančno določiti sestavine, za določitev katerih je zasnovan ta encimski imunološki preskus. Specifičnost ELISA je določena predvsem z navzkrižno reakcijo protiteles ali antigenov (to je sestava, ki se uporablja kot imunosorbent) s sorodnimi spojinami, kot tudi s sestavo inkubacijskega medija (učinek matrike).
Pravilnost - ustreznost povprečne vrednosti rezultatov večkratnih določitev istega kontrolnega vzorca z resnično vrednostjo izmerjenega parametra. Točnost določitve v testu ELISA je odvisna od kakovosti preskusnega sistema in kontrolnega vzorca. Za dobre imunološke testne sisteme so kazalniki pravilnosti v območju 90-110%. Posebnost biomedicinskih raziskav v ELISA je nezmožnost določitve točne vrednosti, zato se kot prava vrednost vzame povprečje več strokovnih laboratorijev. Statistično merilo za pravilnost je aritmetično povprečje in stopnja njegovega odstopanja od dejanske vrednosti, izražena v odstotkih.
Ponovljivost - sposobnost testnega sistema, da pri ponovljenih študijah istega vzorca pokaže enake vrednosti. Ponovljivost je odvisna od naključnih napak (napak) med postopkom reakcije in od kakovosti preskusnih sistemov ter od natančnosti metode zapisovanja rezultatov. Domneva se, da obnovljivost istih kontrolnih vzorcev istega podjetja v različnih laboratorijih ne sme presegati vrednosti koeficienta variacije 15%.
Za določanje virusnih označevalcev hepatitisa obstaja več specifičnih shem ELISA: a) direktni encimski imunski preskus; b) indirektni encimski imunski test; c) konkurenčno zaviranje; c) metoda „pasti“ ali „zajetje“.
Pogosteje se uporabljajo molekularno-biološke metode za diagnosticiranje virusnega hepatitisa, polimerazne verižne reakcije in hibridizacije. Te metode, zlasti PCR, omogočajo zaznavanje zelo majhnih količin specifične virusne DNA ali RNA in s tem sodijo replikacijo, v nekaterih primerih pa tudi replikacijsko aktivnost.
Test krvi proti hepatitisu C
Hepatitis C je ena najpogostejših bolezni jeter, ki se pojavi pri okužbi z virusom hepatitisa C (HCV), ki vstopa v telo predvsem, ko pride v stik s krvjo okužene osebe. Pri 70-80 odstotkih bolnikov z akutnim hepatitisom C ni nobenih simptomov bolezni, le v nekaterih primerih, po določenem času po okužbi, obstajajo manifestacije bolezni, ki se izražajo v utrujenosti, bolečinah v trebuhu, izgubi apetita, temnem urin, bruhanje, slabost, blatni iztrebki, zlatenica, bolečine v sklepih. Praviloma se simptomi pojavijo 6-7 tednov po okužbi, vendar trajanje nastopa znakov bolezni variira od 2 tednov do 6 mesecev. Če se pojavijo zgoraj navedeni simptomi, se morate posvetovati z zdravnikom za nalezljive bolezni in opraviti preiskavo krvi za hepatitis C. Diagnoza hepatitisa, ki se izvede pravočasno, lahko odkrije bolezen v zgodnjih fazah in znatno poveča možnosti za okrevanje.
Ko je načrtovan test na hepatitis C
Primeri, ko je potreben test za hepatitis C:
- med nosečnostjo in načrtovanjem družine;
- bolniki s simptomi kroničnega ali akutnega hepatitisa;
- oseba je v nevarnosti. To so zdravstveni delavci, osebe v zaporu, policisti, ljudje, ki uporabljajo droge, imajo veliko spolnih partnerjev, imajo AIDS, so na hemodializi in drugi.
Priprava na analizo hepatitisa C
Posebna priprava za analizo hepatitisa C ni potrebna. Za analizo vzamemo kri iz vene na prazen želodec, ob istem času pa je treba po zadnjem obroku opraviti vsaj osem ur.
Testi ELISA za hepatitis C
Prva analiza, ponavadi predpisana za diagnozo hepatitisa C - ELISA test (encimsko vezan imunski test). S testi ELISA za hepatitis C je mogoče odkriti prisotnost protiteles proti virusu hepatitisa C (anti-HCVAb) v krvi. Če je rezultat testa ELISA pozitiven, potem kaže na prisotnost telesa z virusom hepatitisa C. Vendar 40% ljudi, ki so imeli pozitiven test ELISA, ne odkrije virusa v krvi. Ta pojav imenujemo lažno pozitiven rezultat. Tudi s pomočjo testa ELISA se preveri donorska kri.
RIBA za hepatitis C
Analiza RIBA za hepatitis C se uporablja za potrditev pozitivnega rezultata ELISA. Metoda rekombinantnega imunoblotinga (RIBA) je natančnejša študija prisotnosti protiteles proti virusu hepatitisa C. Prisotnost virusa hepatitisa C v telesu prav tako ne določa pozitivnega rezultata, temveč potrjuje prisotnost protiteles.
Testiranje hepatitisa C PCR
Da bi odkrili prisotnost virusov hepatitisa C v krvi (HCV RNA) in postavili diagnozo, najpogosteje uporabijo analizo po metodi polimerazne verižne reakcije (PCR). Ta študija omogoča natančno odkrivanje prisotnosti majhne količine virusa v krvi. Analiza PCR za hepatitis C lahko razkrije prisotnost virusa že 5 dni po okužbi, veliko pred pojavom protiteles. Če je rezultat analize PCR pozitiven, pomeni prisotnost aktivne okužbe.
Obstajajo takšne spremembe analize PCR:
- kvantitativni PCR, ki omogoča določanje ne le dejstva prisotnosti virusa, ampak tudi virusne obremenitve (količine virusa). Ta indikator je zelo pomemben za določanje učinkovitosti zdravljenja;
- genotipizacija, ki vzpostavlja genotip virusa hepatitisa C, kar je pomembno za določanje trajanja in taktike zdravljenja. Obstaja več kot 10 genotipov virusa hepatitisa C, vendar je za klinično prakso dovolj opredeliti pet najpogostejših tipov: 1a, 1b, 2,3a / 3b.
Izvede se kvantitativna analiza PCR:
- s kvalitativnim pozitivnim testom za prisotnost RNA virusa hepatitisa C v serumu;
- za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
- določiti taktike zdravljenja bolnika.
Med resnostjo hepatitisa C in količino virusa v krvi ni neposredne povezave. Koncentracija virusa vpliva na infektivnost bolezni, to je večja količina virusa v krvi pacienta, večje je tveganje prenosa virusa, na primer prek spolnega stika ali z matere na otroka. Tudi učinkovitost zdravljenja je odvisna od koncentracije virusa. Med zdravljenjem je ugoden dejavnik nizka virusna obremenitev, zelo visoka pa je neugodna.
Opravljena je analiza genotipov:
- s kvalitativnim pozitivnim testom za prisotnost RNA virusa hepatitisa C v serumu;
- za natančno oceno učinkovitosti zdravljenja;
- določiti taktike zdravljenja bolnika;
- napovedati kroničenje infekcijskega procesa;
- za določitev napredovanja bolezni.
Odkrivanje genotipa virusa je zelo pomembno za določanje trajanja zdravljenja, kar je pomembno, saj ima interferon širok razpon stranskih učinkov in nizko toleranco za paciente.
Analiza dekodiranja hepatitisa C
Običajno virusna RNA, protitelesa proti njim in antigeni so popolnoma odsotni. Prisotnost protiteles v krvi kaže na prisotnost kroničnega ali akutnega hepatitisa C ali obnovitvenega obdobja. Če je v krvi prisotna HCV RNA, ki je določena z analizo PCR, to kaže na prisotnost virusa v krvi.
Z napačno preskusno tehniko, transportom in anomalijami krvi lahko PCR analiza včasih pokaže lažne pozitivne rezultate. Analize ELISA in RIBA v zgodnjih fazah bolezni, ko telo še ni proizvedlo zadostne količine protiteles, lahko kažejo lažno negativni rezultat.
Če pri dešifriranju testa za hepatitis C dobimo pozitivne rezultate, se je treba za nadaljnjo diagnozo in zdravljenje obrniti na zdravnika za infekcijske bolezni in gastroenterologa.
Segmentirani nevtrofilci so bili znižani
Otroške trombocite so normalne, povišane, znižane
Ščitnični hormon TGT
Diagnoza hepatitisa
Ne moremo takoj ugotoviti prisotnosti hepatitisa v telesu, saj lahko inkubacijska doba bolezni traja do štiri tedne. Ko se pojavijo prvi znaki bolezni, se v prizadetem organizmu pojavijo korenite spremembe v sestavi krvi: biokemična analiza poroča o resnih zdravstvenih težavah in prisotnosti patogenega virusa. Vendar pa za dokončno diagnozo ni dovolj darovati kri za hepatitis, kot tudi podrobno diagnozo hepatitisa.
Laboratorijska diagnoza hepatitisa
Zaželeno je, da se izvede po koncu inkubacijske dobe, tako da lahko zdravnik z največjo možno natančnostjo določi bolezen jeter, ki je prisotna v telesu. V nasprotnem primeru predpisano zdravljenje ne bo dalo želenega terapevtskega učinka in celo poslabšalo prevladujočo klinično sliko.
Diagnoza hepatitisa A
Značilno je, da se diagnoza hepatitisa A začne s podrobnim spraševanjem pacienta in imenovanjem številnih testov, ki jih je treba opraviti čim prej. To je:
- biokemični krvni test;
- popolna krvna slika;
- Metoda PCR;
- ELISA;
- koagulogram.
Če Botkinova bolezen napreduje, potem opazimo nenormalni skok bilirubina, AlAT in AsAT, timolnega vzorca po rezultatih biokemične analize krvi. Poleg tega nastajajo specifični anti-HAV IgM, ki so neizpodbitno dejstvo prisotnosti hepatitisa A. t
Na splošno je analiza krvi določena z upadom levkocitov, skokom ESR in limfocitozo. In kljub temu je najbolj zanesljiva metoda PCR, ki določa indikator RNA patogenega virusa.
Poleg tega zdravnik preuči simptome bolezni, nato pa lahko postavi končno diagnozo in preide na najučinkovitejšo terapijo. Potreba po instrumentalnem pregledu je zelo redka. Po uspešnem konservativnem zdravljenju v bolnišničnih pogojih in karanteni bolnika pričakujemo končno okrevanje, hepatitis A pa se ne ponovi.
Diagnoza hepatitisa B
Da bi ugotovili prisotnost virusa hepatitisa B, je možno tudi po rezultatih laboratorijskih testov in za to je prva stvar, ki je potrebna za darovanje krvi za hepatitis. Patogeni virus ima po naravi tri glavne antigene, HBsAg, HBcAg in HBeAg, za katere se v telesu proizvajajo protitelesa. Glavna značilnost te klinične slike je ELISA-ELISA, ki razkriva specifične markerje hepatitisa B.
Takoj je treba pojasniti, da se antigen HBsAg pojavlja v krvi že pred prvimi simptomi hepatitisa in se zanesljivo ugotovi v ledu. Vendar pa negativni test ne izključuje prisotnosti hepatitisa B in zato zahteva uporabo enako učinkovite metode verižne reakcije s polimerazo (PCR).
Če sumite, da je hepatitis B obvezen, je treba opraviti biokemični krvni test, ki ga je priporočljivo preiti na prvo mesto. O individualni obravnavi je treba opraviti biopsijo jeter in ultrazvok peritonealnih organov, ko pa je zgodovina bolezni zelo jasna, ni potrebe po metodah kliničnega pregleda.
Ehogram jeter pri avtoimunskem hepatitisu v fazi kroničnega hepatitisa
Diagnoza hepatitisa C
Da bi postavili to diagnozo, ni dovolj darovati kri za hepatitis, ker lahko virus v telesu prevladuje v latentni obliki. Kljub temu pa so glavni laboratorijski testi vse zgoraj predstavljene analize, kot tudi dodatna učinkovitost biopsije jeter. Ta mikroskopski pregled biološkega materiala (v našem primeru košček jetrnega tkiva) določa obseg patološkega procesa in tkivne fibroze. Vzorčenje materiala poteka pod lokalnimi anestezijo, zapleti takšnega postopka so v medicinski praksi zelo redki.
Če obstaja sum na hepatitis C, je glavna metoda kliničnega pregleda ultrazvok peritonealnih organov. Razlog je preprost: bolezen se pogosto kaže v vidni spremembi prizadete jeter, spremembah v njeni strukturi in velikosti. Na ta način lahko določite:
- velikost jeter, vranice, trebušne slinavke in žolčnika;
- patološke spremembe v teh organih;
- splošni pretok krvi v peritonealnih organih;
- optimalno območje za izvajanje biopsije jeter.
Ta metoda kliničnega pregleda določa vse fokalne patologije organa na mikroskopski ravni. Če so jetra zastopana na zaslonu v sivi lestvici, je potrebna takojšnja biopsija, saj siva barva vizualizira prizadeta tkiva "človeškega filtra".
Preprečevanje hepatitisa
Ker se bolezen ne pojavi takoj, je daleč od vseh kliničnih slik, ki se začnejo zdraviti takoj. Bolnik se preprosto ne zaveda obstoja patogenega virusa v telesu, ki se nato hitro razširi v krvni obtok in okuži zdrave jetrne celice.
Da bi se izognili takšni tragični usodi, je priporočljivo upoštevati vse preventivne ukrepe. Takšna pazljivost bo znatno zmanjšala tveganje obolevnosti in vas v prihodnje rešila pred resnimi zdravstvenimi težavami. Spodaj so predstavljena osnovna pravila preprečevanja:
- si umijte roke po ulici;
- kakovostno predelavo sveže zelenjave in sadja;
- opraviti vsa preventivna cepljenja, določena v letnem koledarskem načrtu;
- selektivni odnos do spolnih partnerjev;
- izogibajte se stiku z bolnimi ljudmi;
- uporabite samo brizge za enkratno uporabo in ste še posebej pozorni na transfuzijske postaje.
Prav tako je priporočljivo redno (enkrat na šest mesecev) darovati kri za hepatitis, da se prepriča, da virus ne prodre v telo in ne okuži zdravih jetrnih celic. Če je diagnoza določena, je treba takoj postati ambulantni račun in upoštevati vsa priporočila specialista.
Avtor publikacije:
Syropyatov Sergej Nikolajevič
Izobrazba: Rostovska državna medicinska univerza (Rostova državna medicinska univerza), Oddelek za gastroenterologijo in endoskopijo.
Gastroenterolog
Doktor medicinskih znanosti